強離子交換洗脫
① Lys Arg Asp Glu Tyr Ala的混合物在高pH條件下加到陰離子交換樹脂上,用連續遞減pH值緩沖溶液洗脫
洗脫先後順序:Arg Lys Tyr Ala Glu Asp
先分組:1 Arg Lys是鹼性氨基酸 PH=7 正電荷
2 Tyr ALa是中性氨基酸 PH=7 中性為主
3 Glu Asp是酸性氨基酸 PH=7 酸性
由於專是交換屬樹脂層析,氨基酸的與樹脂的親和力主要取決於他們之間的親和力,其次是氨基酸與樹脂之間的疏水相互作用。由於緩沖液先是鹼性,所以氨基酸與樹脂的親和力為:酸性氨基酸》中性氨基酸>鹼性氨基酸(陰離子樹脂的疏水基團帶正電,負電被交換了),洗脫的順序就是:鹼性 中性 酸性
考慮氨基酸與樹脂的疏水作用:Arg的R基團是三個亞甲基+一個亞氨基,Lys是四個亞甲基,很明顯,Arg的疏水作用要弱,與樹脂吸引力不夠強,最先被洗下來。其他的兩組樓主自己分析R基團的疏水性
② 在強酸型陽離子交換柱上天冬氨酸,組氨酸,亮氨酸等幾種氨基酸的洗脫順序及原因。
洗脫順來序先後依次是:天冬氨酸、源亮氨酸、組氨酸。
原因:氨基酸與陽離子交換樹脂的靜電引力大小依次是 鹼性氨基酸>中性氨基酸>酸性氨基酸,所以洗脫的順序就先是酸性氨基酸,然後是中性氨基酸,最後是鹼性氨基酸。
天冬氨酸屬於酸性氨基酸,組氨酸屬於鹼性氨基酸,亮氨酸屬於中性氨基酸。
詳見《生物化學》王鏡岩 第三版 上冊 153頁
③ 陰離子交換樹脂洗脫下的是什麼離子
不是,和那電荷無關,和你溶液中離子的濃度有關,濃度越低越容易洗脫,大的話就很難洗脫
④ 離子交換層析中,為什麼用氯離子洗脫陰離子
離子交換層析來中,為什麼用氯源離子洗脫陰離子
陰離子交換柱的填料是正電填料,在低鹽條件下可以通過電荷相互作用吸附樣品中的陰離子和負電荷物質(如DNA).這些帶負電的物質由於其帶電量不同,分子大小不同,因而與正電填料之間的結合力也就不同.用梯度的氯離子(一般用氯化鈉梯度,例如從100mM氯化鈉線性梯度升高到1M氯化鈉)洗脫掛柱樣品時,氯離子會和結合上的物質競爭結合正電填料,伴隨著氯離子濃度的不斷升高,氯離子的競爭作用越來越強,與填料結合的物質會按照親和力從弱到強依次洗脫下來,形成獨立的洗脫峰,從而將這些物質分開.
陽離子交換柱與之正好相反,柱子填料為負電荷,用鈉離子洗脫結合的正電物質.
⑤ 用強酸性陽離子交換樹脂分離氨基酸混合物時,為什麼要逐步提高洗脫液的pH和離子強度
用強酸性陽抄離子交換樹脂分離氨基酸混合物時,氨基酸都是以陽離子的形式,被吸附到樹脂的離子交換位上。
由於氨基酸是兩性化合物,既有酸性,也有鹼性,因此氨基酸都有等電點,pH低於等電點時,呈陽離子狀態,pH高於等電點時,呈陰離子狀態。氨基酸被強酸性離子交換樹脂吸附後,都是以陽離子形式存在的,轉變為陰離子就會被洗脫。通過逐漸提高洗脫液的pH,利用氨基酸不同的等電點,使不同的氨基酸逐漸從陽離子改變為陰離子,而被洗脫出來,從而達到分離效果。
⑥ 採用離子交換柱純化蛋白時,洗脫採用的離子強度的大小范圍應該如何確定
離子交換純化是利用離子交換劑上的可解離基團(活性基團)對各種離子的親和力不一專樣人達到分離的目的的屬一種分離技術。離子交換劑是含有若幹活性基團 的不溶性物質,即在不溶性母體上引入若干可解離基團而成,根據引入解離基團的不同,可以分為陽離子交換劑和陰離子交換劑。各種離子對離子交換劑的親和力各 不相同,親和力隨離子的價數與原子序數增加而增加,而隨離子水化膜半徑的增加而降低。對具體離子交換純化,需要主要離子交換劑的選擇和處理。洗脫不同蛋白 的最恰當的離子強度液不一定一樣,通常採用濃度梯度和PH梯度相結合的方式洗脫,純化不同的蛋白最好先摸一摸洗脫液的離子濃度和PH值……
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離子交換介質 http://proct.bio1000.com/100025/
⑦ 在陽離子交換柱中為什麼極性強的先洗脫下來
雜陽離子交換柱上我們一般用的是苯乙烯和二乙烯苯組成的聚合物,是非極性的;根據相似相溶,自然極性強的先洗脫下來
⑧ 離子交換分離操作中,以高濃度鹽溶液進行洗脫的原理是
用離子交換樹脂進行分離的操作程序包括三個步驟,具體操作過程如下文中所述.
(1)交換柱的制備首先選擇合適的離子交換樹脂類型,用相應的溶液進行處理,如強酸性陽離子交換樹脂需要在稀鹽酸中浸泡,以除去雜質並使之溶脹和完全轉變成H式.然後用蒸餾水洗至中性,裝入充滿蒸餾水的交換柱中.注意防止氣泡進入樹脂層.
(2)交換使待處理水樣以合適的流速通過交換柱進行離子交換.交換完畢後用蒸餾水洗去殘留的溶液及交換過程中形成的酸、鹼或鹽類等.
(3)洗脫洗脫是將已交換到樹脂上的離子分離出來的過程.選擇合適的洗脫液,使之以適宜速度通過交換柱進行洗脫.(更多質量檢測、分析測試、化學計量、標准物質相關技術資料請參考中檢所對照品查詢 www.rmhot.com)
陽離子交換樹脂常用鹽酸溶液作為洗脫液;陰離子交換樹脂常用鹽酸溶液、氯化鈉或氫氧化鈉溶液作洗脫液.對於分配系數相近的離子,可用含有機絡合劑或有機溶劑的洗脫液,以提高洗脫過程的選擇性.
離子交換技術在富集和分離微量或痕量元素方面應用很廣.例如分離水中的鋰離子、錳離子、銅離子、鐵離子、鋅離子等多種金屬離子,首先加入鹽酸使一部分離子轉變為絡合陰離子,然後將水樣通過強鹼性陰離子交換樹脂,各種離子均被交換在樹脂上,最後用不同濃度的鹽酸溶液進行洗脫分離.鋰離子不生成絡合陰離子,不發生交換,可用12mol/L HCl溶液最先洗脫出來
⑨ 離子交換樹脂的洗脫順序和什麼有關
和樹脂的親和力有關,主要是靜電吸引,其次是疏水作用。
樹脂的交聯度,即樹內脂基體容聚合時所用二乙烯苯的百分數,對樹脂的性質有很大影響。通常,交聯度高的樹脂聚合得比較緊密,堅牢而耐用,密度較高,內部空隙較少,對離子的選擇性較強。
而交聯度低的樹脂孔隙較大,脫色能力較強,反應速度較快,但在工作時的膨脹性較大,機械強度稍低,比較脆而易碎。
(9)強離子交換洗脫擴展閱讀:
大孔樹脂內部的孔隙又多又大,表面積很大,活性中心多,離子擴散速度快,離子交換速度也快很多,約比凝膠型樹脂快約十倍。使用時的作用快、效率高,所需處理時間縮短。
大孔樹脂還有多種優點耐溶脹,不易碎裂,耐氧化,耐磨損,耐熱及耐溫度變化,以及對有機大分子物質較易吸附和交換,因而抗污染力強,並較容易再生。
交聯度高的樹脂對離子的選擇性較強,大孔結構樹脂的選擇性小於凝膠型樹脂。這種選擇性在稀溶液中較大,在濃溶液中較小。
⑩ 用732陽離子交換氨水洗脫生物鹼,洗到什麼程度
離子交換樹脂抄是一種合成的高聚物,不溶於水,能吸水膨脹。高聚物分子由能電離的性基團及非極性的樹脂組成。極性基團上的離子能與溶液中的離子起交換作用,而非極性的樹脂本身物性不變。通常離子交換樹脂按所帶的基團分為強酸(=R=S03H)、弱(=C