核酸提取去離子
① DNA怎麼提取
DNA提取的幾種方法
(1).濃鹽法
利用RNP和DNP在電解溶液中溶解度不同，將二者分離，常用的方法是用1M 氯 納提取化鈉抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的 氯仿一起搖盪,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及氯仿相中間，而DNA位於上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA 鈉鹽沉澱出來.
也可用0.15 MNaCL液反復洗滌細胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白,再按氯仿---異醇法除去蛋白.
兩種方法比較,後種方法使核酸降解可能少一些.
以稀鹽酸溶液提取DNA 時,加入適量去污劑,如SDS可有助於蛋白質與DNA 的分離。在提取過程中為抑制組織中的DNase對DNA 的降解作用,在氯化鈉溶液中加入檸檬酸鈉作為金屬離子的烙合劑.通常用.15MNaCL,0.015M檸檬鈉,並稱SSC溶液,提取DNA.
（2）.陰離子去污劑法:
用SDS或二甲苯酸鈉等去污劑使蛋白質變性,可以直接從生物材料中提取DNA .由於細胞中DNA與蛋白質之間常借靜電引力或配位鍵結合,因為陰離子去污劑能夠破壞這種價鍵,所以常用陰離子去污劑提取DNA.
（3）.苯酚抽提法:
苯酚作為蛋白變性劑,同時抑制了DNase的降解作用.用苯酚處理勻漿液時,由於蛋白與DNA 聯結鍵已斷,蛋白分子表面又含有很多極性基團與苯酚相似相溶。蛋白分子溶於酚相，而DNA溶於水相。離心分層後取出水層，多次重復操作，再合並含DNA 的水相，利用核酸不溶於醇的性質，用乙醇沉澱DNA 。此時DNA是十分粘稠的物質，可用玻璃漫漫繞成一團，取出。此法的特點是使提取的DNA保持天然狀態 .
（ 4）.水抽提法:
利用核酸溶解於水的性質,將組織細胞破碎後,用低鹽溶液除去RNA，然後將沉澱溶於水中，使DNA充分溶解於水中,離心後收集上清液.在上清中加入固體氯化鈉調節至2.6M.加入2倍體積95%乙醇,立即用攪拌法攪出.然後分別用66% ٠80%和95%乙醇以及丙銅洗滌,最後在空氣中乾燥,既得DNA樣品.此法提取的DNA中蛋白質含量較高,故一般不用.為除蛋白可將此法加以改良,在提取過程中加入SDS.
② 核酸的提取
要回答這個問題要確定你是在哪一步發現降解了。
是在質粒提取後後，直接點樣發現降解的話，可能是提取過程中大腸桿菌富含DNase，或是操作過程中鹼裂解過長
如果是在酶切過程中降解了，可能有鹽離子污染導致特異性酶變成非特異性酶了，把質粒都降解了。
如果是在保存一段時間發現降解了，可能是保存液不是TE或是質粒發生了降解。具體要分析一下
③ 核酸提取物是什麼
核酸也稱多聚核苷酸，是由許多個核苷酸聚合而成的生物大分子，核苷酸是由含氮的鹼基、核糖或脫氧核糖、磷酸三種分子連接而成。鹼基與糖通過糖苷鍵連接成核苷，核苷與磷酸以酯鍵連接成核苷酸。核苷酸是生物體內一類重要含氮化合物，是各種核酸的基本組成單位。根據核酸所含戊糖的不同，可分為核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)二種。 核酸不但是一切生物細胞的基本成分，還對生物體的生長、發育、繁殖、遺傳及變異等重大生命現象起主宰作用。它在生物科學的地位，可用「沒有核酸就沒有生命」這句話來概括。 飲食核酸的營養保健作用如下： 1.飲食核酸與免疫 『 從核酸對機體各系統的影響來看，免疫系統是最敏感也是最直接受影響的系統。實驗表明，核酸是維持機體正常免疫功能和免疫系統生長代謝的必需營養物質。
2.飲食核酸與衰老和內分泌 衰老是機體各組織器官的退行性變化，代謝性、退行性疾病的發生和發展與體內過氧化脂質含量高度正相關。飲食核酸能增加血漿單不飽和脂肪酸和co-3、¨6系列多不飽和脂肪酸的含量，多不飽和脂肪酸的增加可提高機體對抗自由基的能力。飲食核酸作為使遺傳物質活潑代謝的原料，具有極強的抗生物氧化、消除體內自由基和全面增強免疫功能及性激素分泌的作用，因此在延緩衰老方面優勢顯著。
3.飲食核酸與增殖細胞 飲食中補加核酸有助於肝臟再生和受損傷的小腸恢復功能，飲食核酸是維持肝臟處於正常生理狀態的必需營養物質。血液中的紅細胞、白細胞、血小板和血漿蛋白等也都是代謝較快的增殖細胞系，加之它們中的大多數均無從頭合成核酸的能力，因此它們的代謝和功能也都需要充足的核酸營養。再生障礙性貧血和抗癌葯物、放療、化療等引起的貧血，即缺鐵性貧血之外的貧血均需補充核酸營養，以改善骨髓造血功能和血液成分的代謝活力。
4.飲食核酸與癌症 人體每日約有數百萬個癌狀細胞出現，它們幾乎全部被機體的免疫監視系統和核酸、維生素等食物成分，在形成大的癌細胞克隆前排除掉。因此在日常生活中盡量避免致癌因子的作用，增加核酸等防癌因素的作用非常必要。
5.飲食核酸與痴獃等神經障礙 食物核酸提取物對痴呆症狀的改善非常令人鼓舞。老年痴呆患者腦內神經纖維變化多的部位，RNA和蛋白質合成顯著減少，因此發生記憶障礙。
6.飲食核酸與循環系統 核酸營養對循環系統的作用是抑制過氧化脂質的形成，抑制膽固醇的生成，擴張血管，改善血流，糾正心肌代償不良，促進血管壁再生，抑制血小板凝集，因此核酸被認為對腦血栓、心肌梗死、高血壓和動脈粥樣硬化症有較好的營養保健作用。
7、飲食核酸與糖尿病 非胰島素依賴性糖尿病與生活方式和運動不足關系密切，目前尚無特效療法，飲食療法常常被應用於這類患者。如果在普通的飲食療法的基礎上，再加上核酸飲食，將收到更好的效果。 除上述作用外，飲食核酸還有以下作用：減肥，提高機體對環境變化的耐受力，顯著的抗疲勞、增強機體對冷熱的抵抗力、促進攝人氧氣的利用，促進小鼠生殖系統的發育等。 對於嬰兒、迅速成長期的孩子、老年體弱多病、全身感染、外傷手術者、肝功能不全以及白細胞、T細胞、淋巴細胞降低人群等，可以額外補充核酸類物質。世界衛生組織規定，每天膳食中核酸的量不大於2克，扣除食物中的核酸攝入量，每天補充小於1.5克核酸是合適的。 食物中，魚類等海產品富含核酸，此外動物肝臟、腦、心、瘦肉，豆類及豆製品，筍，波菜，蘑菇，木耳，花粉，酵母，香蕉，葡萄，胡蘿卜，番茄，蘋果，桔子等，含核酸也較豐富。核酸產品有核酸調味品、食品添加劑及保健食品。
2核酸是什麼
很多人對核酸是什麼並不是很清楚，所以在對它補充的時候，也是需要對它進行很好的認識，使得選擇它的時候，也是可以放心進行，不會危害到自身健康。
核酸是什麼：
由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，為生命的最基本物質之一。核酸廣泛存在於所有動植物細胞、微生物體內，生物體內的核酸常與蛋白質結合形成核蛋白。不同的核酸，其化學組成、核苷酸排列順序等不同。根據化學組成不同，核酸可分為核糖核酸(簡稱RNA)和脫氧核糖核酸(簡稱DNA)。DNA是儲存、復制和傳遞遺傳信息的主要物質基礎。RNA在蛋白質合成過程中起著重要作用——其中轉運核糖核酸，簡稱tRNA，起著攜帶和轉移活化氨基酸的作用;信使核糖核酸，簡稱mRNA，是合成蛋白質的模板;核糖體的核糖核酸，簡稱rRNA，是細胞合成蛋白質的主要場所。
④ 核酸提取儀的主要步驟及方法
核酸提取儀，是應用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸的提取工作的儀器，核酸提取儀分為兩類：一類是大型的自動化的，一般稱為自動液體工作站；另一類是小型自動核酸提取儀，利用封裝好的配套試劑自動完成提取純化過程。大型自動液體工作站因為設備成本高昂，運行成本高，適合一次提取幾千個同一種類標本，所以真正得到應用的比較少；而小型自動化的儀器，因為儀器設備和運行成本低，操作方便 得到越來越多的應用。
Nucleic Acid Extraction System是使用通用磁珠法提取核酸的高科技產品，具有自動化程度高，提取速度快，結果穩定，操作簡便的優點。利用一般生化專用的96孔反應盤，可同時操作1-32個樣品，可廣泛應用於常規科研、基因組學、疾控系統、食品安全、法醫等領域。使用本儀器只需加入樣品與以磁珠為載體的全自動核酸提取試劑於96孔專用反應盤中，選擇或編輯適當程序後執行即可。搭配不同種類的磁珠核酸試劑組，可以快速提取動植物組織、血液、體液、刑事檢體等樣品中的DNA和RNA
大屏幕全中文操作
大屏幕全中文顯示；觸屏式操作，簡單易用。
精確控制
內建工程用電腦，無需再連接個人電腦；單機操作節省更多的空間與能源，並提供高穩定度的自動化控制系統。
溫度控制
可根據需求自定義裂解、洗脫溫度。
自由編程
強大的程序編輯功能；靈活、高效地定義您的應用，可滿足不同試劑要求。
快速提取
操作時間短，30-60分鍾/次；適量大，每次可同時提取1-32份樣品。
高純度、高得率
可根據試劑優化提純方案，配合精確的溫育時間，實現了更高的提取效率，提取的DNA/RNA純度高，可以直接用於PCR和RT-PCR。
結果穩定
避免人工操作引起的差異及錯誤，結果溫度，重復性好。
自我清潔
具有內置可定時紫外消毒功能。
污染控制
嚴格控制孔間污染及批次間污染，杜絕交叉污染。
試劑開放
可使用各種磁珠法提取試劑。
安全可靠
開門自動鎖定保障操作安全；封閉提取倉，一次性耗材，最大程度減少操作者與試劑的接觸；智能化操作，避免有害物質對人體的危害。
⑤ 核酸的分離提取屬於分子生物學的哪個范疇
DNA重組，PCR技術，質粒的提取，酶切，分子標志和基因克隆都有涉及核酸的提取。
⑥ 核酸提取中除去蛋白質的方法主要有哪幾種
可以用氯仿抽提之後離心，離心後分三層，下層有機層中有一些脂溶性的雜質，中間層白色絮狀沉澱是蛋白，上清液中即含有核酸。也有很多試劑盒，是可以把核酸掛在柱子上，把蛋白質等雜質離心掉，這個方法即快捷又方便。
凝膠過濾，這是很容易去除小分子雜質物質的方法。
如果蛋白樣本和核酸的分子大小差別比較大，可以考慮用超濾的方法。
超濾是以壓力為推動力的膜分離技術之一，以大分子與小分子分離為目的 。
加入核酸酶消化三個小時。
比如加一定量的DNAase 和RNAse酶消化。
(6)核酸提取去離子擴展閱讀：
核酸模板在核酸聚合酶、引物、四種單脫氧核苷酸存在條件下復制或轉錄時，如果在四管反應系統中分別按比例引入四種雙脫氧核苷酸，只要雙脫氧核苷酸摻入鏈端，該鏈就停止延長，鏈端摻入單脫氧核苷酸的片段可繼續延長。
如此每管反應體系中便合成以共同引物為5』端，以雙脫氧核苷酸為3』端的一系列長度不等的核酸片段。反應終止後，分四個泳道進行電泳。以分離長短不一的核酸片段（長度相鄰者僅差一個核苷酸），根據片段3』端的雙脫氧核苷酸，便可依次閱讀合成片段的核苷酸排列順序。
⑦ 核酸分離提取的原則是什麼
核酸分離提取的原則
核酸包括DNA、RNA兩種分子，在細胞中都是以與蛋白質結合的狀態存在。真核生物的染色體DNA為雙鏈線性分子，原核生物的「染色體」、質粒及真核細胞器DNA為雙鏈環狀分子；有些嗜菌體DNA有時為單鏈環狀分子，RNA分子在大多數生物體內均是單鏈線性分子，不同類型的RNA分子可以具有不同的結構特點，如真核mRNA分子多數在3』端帶有poly(A)結構，至於病毒的DNA、RNA分子，其存在形式多種多樣，有雙鏈環狀、單鏈環狀、雙鏈線狀及單鏈線狀等。
95%的真核生物DNA主要存在於細胞核內，其它5%為細胞器DNA，如線粒體、葉綠體等。RNA分子則主要存在於細胞質中，約佔75%，另有10%在細胞核內，15%在細胞器中，RNA以rRNA的數量最多（80％-85%），tRNA及核內小分子RNA佔10%-15%，而mRNA分子大小不一，序列各異。總的來說，DNA分子的總長度一般隨著生物的進化程度而增大，而RNA的分子量與生物進化無明顯關系。
分離純化核酸總的原則：
1.應保證核酸一級結構的完整性；2.排除其它分子的污染。
為了保證核酸結構與功能的研究，完整的一級結構是最基本的要求，因為遺傳信息全部貯存在一級結構之中，核酸的一級結構還決定其高級結構的形式以及和其它生物大分子結合的方式。對於核酸的純化應達到以下三點要求：
1.核酸樣品中不存在對酶有抑製作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子；
2. 其它生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降到最低程度；
3. 排除其它核酸分子的污染，如提取DNA分子時應去除RNA，反之亦然.
為了保證分離核酸的完整性和純度，在實驗過程中，應注意以下事項:
1. 盡量簡化操作步驟，縮短提取過程，以減少各種有害因素對核酸的破壞；
2.減少化學因素對核酸的降解，為避免過酸、過鹼對核酸鏈中磷酸二酯鍵的破壞，操作多在pH4-10的條件下進行;
3.減少物理因素對核酸的降解，物理降解因素主要是機械剪切力，其次是高溫。機械剪切力包括強力高速的溶液振盪、攪拌，使溶液快速地通過狹長的孔道，細胞突然置於低滲液中，細胞爆炸式破裂以及DNA樣本的反復凍貯。這些操作細節在實驗操作中應倍加註意。機械剪切作用的主要危害對象是大分子量的線性DNA分子，如真核細胞的染色體DNA。對分子量小的環狀DNA分子，如質粒DNA及RNA分子，威脅相對小些。高溫如長時間煮沸，除水沸騰帶來的剪切力外，高溫本身對核酸分子中的有些化學鍵也有破壞作用。核酸提取過程中，一般在低溫操作，但現在發現在室溫快速提取與低溫提取，獲得核酸的質量沒有太大差異.
4.防止核酸的生物降解，細胞內或外來的各種核酸酶消化核酸鏈中的磷酸二酯鍵，直接破壞核酸的一級結構，其中DNA酶，需要金屬二價離子Mg2 、Ca2 的激活，使用EDTA、檸檬酸鹽螯合金屬二價離子，基本可以抑制DNA酶活性。而RNA酶不但分布廣泛，極易污染樣品，而且耐高溫、耐酸、耐鹼、不易失活，所以是生物降解RNA提取過程的主要危害因素.
核酸提取的主要步驟，無外乎破碎細胞，去除與核酸結合的蛋白質以及多糖、脂類等生物大分子，去除其它不需要的核酸分子，沉澱核酸，去除鹽類，有機溶劑等雜質，純化核酸等。核酸提取的方案，應根據具體生物材料和待提取的核酸分子的特點而定，對於某特定細胞器中富集的核酸分子，事先提取該細胞器，然後提取目的核酸分子的方案，可獲得完整性和純度兩方面質量均高的核酸分子。
⑧ 請問DNA提取過程中70%乙醇是如何配製的所用水是去離子水還是經過其他處置的水
就是體積比
70ml無水乙醇加30ml的去離子水 去離子水要滅過菌的
⑨ 核酸分離時為什麼要除去小分子物質和脂類物質
大多數核酸分離與純化的方法一般都包括了細胞裂解、酶處理、核酸與其他生物大分子物質分離、核酸純化等幾個主要步驟.每一步驟又可由多種不同的方法單獨或聯合實現。
1、細胞裂解：核酸必須從細胞或其他生物物質中釋放出來。細胞裂解可通過機械作用、化學作用、酶作用等方法實現。
2、酶處理：在核酸提取過程中，可通過加入適當的酶使不需要的物質降解，以利於核酸的分離與純化。如在裂解液中加入蛋白酶(蛋白酶K或鏈酶蛋白酶)可以降解蛋白質,滅活核酸酶(DNase和RNase)，DNase和RNase``rightleder也用於去除不需要的核酸。