陽離子交換介質吸附蛋白類型
㈠ 用於蛋白質提取分離的離子交換劑有哪些特殊的要求,主要有哪幾類
離子交換層析根據帶電強弱分為:強陽離子交換層析、強陰離子交換層析、弱陽離子交換層內析、弱陰離子交換容層析。填料的孔徑也有分別,詳細可以咨詢各品牌代理商。
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㈡ 離子交換層析可以用於哪些蛋白質的分離
可以分為陽離子交換層析和陰離子交換層析。
陽離子交換層析,使用含有酸性基團版的陽離子交換樹脂等,權可以結合待層析液中的陽離子,因而洗脫順序是,正電荷越多結合越緊密洗脫越晚。
陰離子交換層析則使用含有鹼性基團的交換樹脂,結合溶液中的含有陰離子基團的分子,因而負電荷越多結合越緊密,洗脫越晚。
㈢ 蛋白質分離純化的四種方法
1、鹽析法:
鹽析法的根據是蛋白質在稀鹽溶液中,溶解度會隨鹽濃度的增高而上升,但當鹽濃度增高到一定數值時,使水活度降低,進而導致蛋白質分子表面電荷逐漸被中和,水化膜逐漸被破壞,最終引起蛋白質分子間互相凝聚並從溶液中析出。
2、有機溶劑沉澱法:
有機溶劑能降低蛋白質溶解度的原因有二:其一、與鹽溶液一樣具有脫水作用;其二、有機溶劑的介電常數比水小,導致溶劑的極性減小。
3、蛋白質沉澱劑:
蛋白質沉澱劑僅對一類或一種蛋白質沉澱起作用,常見的有鹼性蛋白質、凝集素和重金屬等。
4、聚乙二醇沉澱作用:
聚乙二醇和右旋糖酐硫酸鈉等水溶性非離子型聚合物可使蛋白質發生沉澱作用。
(3)陽離子交換介質吸附蛋白類型擴展閱讀:
蛋白質是生命的物質基礎,是有機大分子,是構成細胞的基本有機物,是生命活動的主要承擔者。沒有蛋白質就沒有生命。氨基酸是蛋白質的基本組成單位。它是與生命及與各種形式的生命活動緊密聯系在一起的物質。
機體中的每一個細胞和所有重要組成部分都有蛋白質參與。蛋白質占人體重量的16%~20% ,即一個60kg重的成年人其體內約有蛋白質9.6~12kg。
人體內蛋白質的種類很多,性質、功能各異,但都是由20多種氨基酸(Amino acid)按不同比例組合而成的,並在體內不斷進行代謝與更新。
㈣ 離子交換曾新與親和層析兩種轉化分子力蛋白的哪種方法效果好
離子交換曾新與親和層析兩種轉化分子力蛋白的哪種方法效果好
離子交換層析是利用離子交換劑上的可交換離子與周圍介質中被分離的各種離子間的親和力不同,經過交換平衡達到分離的目的的一種柱層析法.
該法可以同時分析多種離子化合物,具有靈敏度高,重復性、選擇性好,分離速度快等優點,是當前最常用的層析法之一,常用於多種離子型生物分子的分離,包括蛋白質、氨基酸、多肽及核酸等.
離子交換層析對物質的分離通常是在一根充填有離子交換劑的玻璃交換劑的玻璃管中進行的.
離子交換劑為人工合成的多聚物,其上帶有許多可電離基團,根據這些基團所帶電荷的不同,可分為陰離子交換劑和陽離子交換劑.
含有預被分離的離子的溶液通過離子交換柱時,各種離子即與離子交換劑上的荷電部位競爭結合.
任何離子通過柱時的移動速率取決於與離子交換劑的親和力、電離程度和溶液中各種競爭性離子的性質和濃度.
離子交換劑是由基質、荷電基團和反離子構成,在水中呈不溶解狀態,能釋放出反離子.
同時它與溶液中的其他離子或離子化合物相互結合,結合後不改變本身和被結合離子或離子化合物的理化性質.
離子交換層劑與水溶液中離子或離子化合物所進行的離子交換反應是可逆的.
假定以RA代表陽離子交換劑,在溶液中解離出來的陽離子A+與溶液中的陽離子B+可發生可逆的交換反應:RA+B+↔RB+A+;該反應能以極快的速度達到平衡,平衡的移動遵循質量作用定律.
㈤ 採用離子交換柱純化蛋白時,洗脫採用的離子強度的大小范圍應該如何確定
離子交換純化是利用離子交換劑上的可解離基團(活性基團)對各種離子的親和力不一專樣人達到分離的目的的屬一種分離技術。離子交換劑是含有若幹活性基團 的不溶性物質,即在不溶性母體上引入若干可解離基團而成,根據引入解離基團的不同,可以分為陽離子交換劑和陰離子交換劑。各種離子對離子交換劑的親和力各 不相同,親和力隨離子的價數與原子序數增加而增加,而隨離子水化膜半徑的增加而降低。對具體離子交換純化,需要主要離子交換劑的選擇和處理。洗脫不同蛋白 的最恰當的離子強度液不一定一樣,通常採用濃度梯度和PH梯度相結合的方式洗脫,純化不同的蛋白最好先摸一摸洗脫液的離子濃度和PH值……
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離子交換介質 http://proct.bio1000.com/100025/
㈥ 怎樣使用離子交換析法分離不同的蛋白質
你好,離子交換內的介質一般是樹脂,陽離子交換型的,使用前樹脂先用鹼處理成鈉型。希望對你有所幫助。
㈦ 求設計一用離子交換法分離蛋白質的試驗方案.
你的目標蛋白是什麼?五中蛋白中應該只有一種才是目的蛋白,其餘是雜質啊
例如陰離子版交換介質吸權附的是陽離子,即蛋白質處於一個PH比其自身等電點低的環境中。
裝柱 氫氧化鈉處理 磷酸鹽緩沖液平衡 上樣 吸附目標蛋白 流穿峰出現 磷酸鹽緩沖液洗脫 不同離子強度的氯化鈉洗脫(分段、梯度)
收集 檢測蛋白質純度含量等
㈧ 離子交換層析可用於哪些種類蛋白質的分離
離子來交換層析是利用蛋白質在不同自PH帶不同種電荷的方法,利用離子交換的方法分離蛋白的。
離子交換內的介質一般是樹脂,陽離子交換型的,使用前樹脂先用鹼處理成鈉型,將氨基酸混合液(pH=2-3)上柱,pH=2-3時,氨基酸主要以陽離子形式存在,與樹脂上的鈉離子發生交換而被「掛」在樹脂上,再用洗脫劑洗脫。不同的氨基酸(帶的電荷不同)與樹脂的親和力不同,要將其分離洗脫下來,需要降低它們之間的親和力,方法是逐步提高洗脫劑的pH和鹽濃度,這樣各種氨基酸將以不同的速度被洗脫下來,反之亦然。
不同反荷離子與樹脂親和力是不同的,其強弱關系為陽性競爭離子:Ag+〉CS+〉K+〉NH4+〉Na+〉H+〉Li+ 陰性競爭離子:I->NO3->(PO4)3->CN-〉HSO3-〉Mg2+〉HCO3-〉HCOO-〉CH3COO-〉OH-〉F- 如果某種離子溶液洗脫效果不好,可用另一種親和力強的離子代替之,等電點>7選擇陽離子交換樹脂,等電點<7選擇陰離子交換樹脂。