deae離子交換層析原理

① 詢ESCO生物安全櫃技術資料

esco 二級生物安全櫃的詳細介紹 1.按照en12469標准生產和檢測 2.兩塊ulpa高效過濾器，針對0.12um顆粒系可以達到3.99.9999％截流效率 4.滑動式前窗，254mm工作高度 5.人性化擱手架設計，降低工作疲勞強度 6.底部檯面分為若干小塊，方便清洗 7.直面設計，兩側玻璃透明邊窗 可選配置： ac2-uv 紫外燈 ac2-ss 760mm支架 ac2-po 櫃內防濺電源插座 ac2-sv 各類閥門 技術指標： 1. 外部尺寸(長x寬x高) mm： ac2-3a1：1035 x 769 x 1345 ac2-4a1：1340 x 769 x 1345 ac2-5a1：1645 x 769 x 1345 ac2-6a1：1950 x 769 x 1345 2.內部尺寸(長x寬x高) mm： ac2-3a1：965 x 540 x 630 ac2-4a1：1270 x 540 x 630 ac2-5a1：1575 x 540 x 630 ac2-6a1：1880 x 540 x 630 3.截留效率：99.9999% (針對0.12um顆粒系) 4.噪音標准：低於60dba 離子交換層析根據化合物的凈電荷進行分離。帶負電荷或正電賀的官能團共價結合於固相載體基質，分別成為陽離子交換劑和陰離子交換劑。主要有以下幾大類：1、unosphere 離子交換介質；unosphere 離子交換介質是為滿足生物制葯界對具有更高生產能力層析的需要而設計的。unosphere 是新一代的親水聚丙烯醯胺多聚載體，有一步聚合而成，具有高結合能力和低背壓的特點，從而可提供更高的生產能力。一步聚合法生產的載體具有無可比擬的品質和批間穩定性。主要特性：適合在背壓2 bar ，線性速度1200 cm/hr 下運行；在1m 的naoh 中，仍能保持10000 小時穩定性。 2、macro-prep 離子交換介質；macro-prep high q, deae, high s, 和cm 層析介質。macro-prep 25s和25q 層析介質。macro-prep 離子交換介質滿足了分析型、半制備型和工業化應用的要求。它是剛性的大孔疏水介質，具有很好的載量、解析度和通量，且化學和機械性能穩定。3、分析純離子交換樹脂；ag分析純樹脂；bio-rex 樹脂；chelex 樹脂；4、分子生物純與生物工藝純樹脂；ag 50w-x8 強陽離子交換樹脂；ag 501-x8 混合床樹脂；chelex 100 分子生物純樹脂；生物工藝純樹脂；5、預裝離子交換柱；econo-pac 離子交換濾柱6、預裝poly-prep 離子交換柱；預裝poly-prep 柱，用於重力流層析樣品制備和其它小規模試驗。7、uno monolith 離子交換層析柱；8、aminex hplc 柱由聚苯乙烯二乙烯苯樹脂填裝而成的aminex hplc 柱。9、離子交換層析標准品10、有機酸標准品11、碳水化合物標准品

② DEAE-52離子交換層析中怎樣確定Nacl濃度范圍

要是沒有任何文獻來報源道過的，預試驗建議作全部的0%-100%，然後看最後的OD值合並峰值附近的收集液SephadexG-25除鹽，然後測定活性，確定你要收集的峰。這樣肯定不會漏掉你要的峰。然後你就可以重復實驗了。

③ 請問羧甲基纖維素和DEAE纖維素分離蛋白有什麼區別

羧甲基纖維素是弱陽離子交換填料，要求使用時的pH值要低於目的蛋白質等電點起碼0.5個pH值單位，為了達到較好的分離效果，實際使用時最好是低於1個以上pH值單位。在低pH值下，有的不耐酸的雜質蛋白質會變性，屆時離心除去，可首先去除一部分雜質蛋白質。
DEAE纖維素是弱陰離子交換層析填料，要求使用時的pH值要高於目的蛋白質等電點起碼0.5個pH值單位，為了達到較好的分離效果，實際使用時最好是高於1個以上pH值單位。大多數蛋白質的等電點在6.0左右，可以耐受8.0，所以依據pH提高使得某些雜質蛋白質變性的做法多數情況下不可行。
這兩種填料的工作pH值不同，但都可以用氯化鈉來洗脫。交換基團不同，分離效果也不同，可以先用一種來純化，得到初步純化的產物之後再用另一種來純化。因為有些蛋白質不能耐受酸，所以我建議先用羧甲基纖維素弱陰離子交換層析，再用DEAE纖維素弱陽離子交換層析，產物的純度比單用一種時更高。
在對蛋白質的破壞方面，弱交換填料比強交換填料好，有的蛋白質用強離子交換來純化，蛋白質結合再交換之後會損失很多活力，但是弱離子交換則損失的活力較少。但是弱離子交換的解析度比強離子交換差一些。如果純化得不好，又有強離子交換的，就試一下吧。lxj341401(站內聯系TA)一個是陽離子交換填料，一個是陰離子交換填料，用哪個跟蛋白值的等電點pI還有所用緩沖液的pH有關，pH>pI時帶負電荷，蛋白質能吸附到陰離子交換填料，相反的用陽離子交換。所以能不能代替看具體情況了。悅迷008(站內聯系TA)Originally posted by 冼亮澱粉酶 at 2011-07-15 06:00:21:
這兩個填料雖然都是離子交換用的，但一個是弱陰一個是弱陽，效果不同，沒有一個能代替另一個的說法。

④ 在蛋白質純化中，除了離子交換層析之外，還有哪些常用的柱層析方法純化蛋白質

在蛋白質純化中，除了離子交換層析之外，還有哪些常用的柱層析方法純化蛋白質
離子交換層析是根據蛋白質所帶電荷的差異進行分離純化的一種方法.蛋白質的帶電性是由蛋白質多肽中帶電氨基酸決定的.由於蛋白質中氨基酸的電性又取決於介質中的pH,所以蛋白質的帶電性也就依賴於介質的pH.當pH較低時,負電基團被中和,而正電基團就很多; 在pH較高時,蛋白質的電性與低pH時相反.當蛋白質所處的pH,使蛋白質的正負電荷相等,此時的pH稱為等電點.離子交換層析所用的交換劑是經酯化、氧化等化學反應引入陽性或陰性離子基團製成的,可與帶相反電荷的蛋白質進行交換吸附.帶有陽離子基團的交換劑可置換吸附帶負電荷的物質,稱為陰離子交換劑,如DEAE-纖維素樹脂;反之稱為陽離子交換劑,如CM-纖維素樹脂.不同的蛋白質有不同的等電點,在一定的條件下解離後所帶的電荷種類和電荷量都不同,因而可與不同的離子交換劑以不同的親和力相互交換吸附.當緩沖液中的離子基團與結合在離子交換劑上的蛋白質相競爭時,親和力小的蛋白質分子首先被解吸附而洗脫,而親和力大的蛋白質則後被解吸附和洗脫.因此,可通過增加緩沖液的離子強度和/或改變酸鹼度,便可改變蛋白質的吸附狀況,使不同親和力的蛋白質得以分離.

⑤ DEAE-纖維素離子交換層析法可用於分離純化蛋白質，主要是由於：

答案D
分配層析利用樣品各組分在固定相和流動相間溶解度的不同內(分配系數不同)來進行分離；容吸附層析法利用吸附劑表面對樣品組分吸附能力強弱不同來進行分離；親和層析由於配體與待分離物質進行特異性結合；DEAE-纖維素離子交換層析法利用樣品組分對離子交換劑靜電力的差異來進行分離。

⑥ 用過的sephadex G-25層析柱和DEAE纖維素離子交換柱再生的方法為什麼不一樣

飛秒檢測發現sephadex G-25層析柱填料是葡聚糖交聯的凝膠柱，G-X, X：（1）交聯度。X越小，交聯度越大，網孔越小，適用於分離低分子量產品，反之亦然。（2）吸水量。為凝膠得水值的10倍.例如,G-25為每克凝膠膨脹時吸水2.5克.凝膠柱使用一次後，必須反沖疏鬆一次，平衡後再使用。若使用數次，就需要再生處理。用0.1mol/L NaOH-0.5mol/L NaCl溶液浸泡，然後用蒸餾水洗至中性備用。若實驗完畢，將再生後的凝膠在布氏漏鬥上用蒸餾水洗滌抽干，再用95%乙醇洗兩次，在60℃烘箱中烘乾，回收保存。
DEAE-纖維素為二乙氨乙基纖維素，是陰離子交換劑。基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。離子交換層析中，基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。帶有正電荷的稱之陰離子交換樹脂；而帶有負電荷的稱之陽離子樹脂。離子交換層析同樣可以用於蛋白質的分離純化。由於蛋白質也有等電點，當蛋白質處於不同的pH條件下，其帶電狀況也不同。陰離子交換基質結合帶有負電荷的蛋白質，所以這類蛋白質被留在柱子上，然後通過提高洗脫液中的鹽濃度等措施，將吸附在柱子上的蛋白質洗脫下來。結合較弱的蛋白質首先被洗脫下來。反之陽離子交換基質結合帶有正電荷的蛋白質，結合的蛋白可以通過逐步增加洗脫液中的鹽濃度或是提高洗脫液的pH值洗脫下來。離子交換劑的再生與保存離子交換劑可在柱上再生。如離子交換纖維素可用2mol/：NaCl淋洗柱，若有強吸附物則可用0.1mol/LNaOH洗柱；若有脂溶性物質則可用非離子型去污劑洗柱後再生，也可用乙醇洗滌，其順序為：0.5mol/LNaOH-水-乙醇-水-20%NaOH-水。保存離子交換劑時要加防腐劑。對陰離子交換劑宜用0.002%氯已定（洗必泰），陽離子交換劑可用乙基硫柳汞（0.005%）。有些產品建議用0.02%疊氮鈉。
兩種填料的抗酸鹼性和抗腐蝕性能不同。

⑦ 7.下列關於用離子交換纖維素色譜法分離蛋白質原理的敘述哪一個是正確的

答案D
分配層析利用樣品各組分在固定相和流動相間溶解度的不同專(分配系數不同)來進行分離；吸附屬層析法利用吸附劑表面對樣品組分吸附能力強弱不同來進行分離；親和層析由於配體與待分離物質進行特異性結合；DEAE-纖維素離子交換層析法利用樣品組分對離子交換劑靜電力的差異來進行分離。