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瓊脂糖樹脂孔徑

發布時間: 2021-04-04 00:33:45

⑴ 瓊脂糖電泳電流值是多少

蛋白質電泳(一般指SDS-PAGE)一般使用的都是聚丙烯醯胺凝膠電泳,電泳的驅動力靠與蛋白質結合的SDS上所攜帶的負電荷。
所以相同點就是樣品都是帶負電荷的,從負極向正極移動,移動的距離都和樣品的分子量有關。而且這兩個電泳體系可以互相交換使用。進行大分子蛋白質電泳時,可以考慮換用瓊脂糖凝膠,因為該體系孔徑大。相反,如果需要精確到各位數鹼基的DNA電泳也可以使用聚丙烯醯胺凝膠系統,因為使用該系統可以將相差一個鹼基的兩條DNA鏈分開。
不同點首先是樣品不同。這個就不用多說了。其次是結果的觀察方法不同。DNA電泳普遍使用EB做染料,在紫外燈下觀察;而蛋白電泳使用的考馬斯亮藍染色,還需要經過脫色步驟,不過觀察起來比較簡單。還有就是膠體系的差別,DNA電泳通常是一膠跑到底,而蛋白質電泳則會有分離膠和濃縮膠之區別。
電泳中樣品移動的本質確實是樣品所攜帶的電荷。但是,區分這些條帶直接可以用分子量而無需使用電荷數,是因為這些樣品的電荷/分子量比都是恆定的了。以DNA分子為例,它在電泳中的移動是靠其骨架中磷酸所攜帶的負電荷來實現的,而這個磷酸分子又是每一個核苷酸中都有的,所以DNA分子所攜帶的負電荷數是由其核苷酸總數決定的。而且,DNA分子中核苷酸的組成動輒成百上千,在如此大的分子量面前,討論單個核苷酸之間分子量的差別就顯得毫無意義。這樣,DNA分子中負電荷的量就可以用DNA的分子量來代替,反過來,DNA的分子量也就可以用DNA分子所攜帶的電荷來代替(一句話,DNA分子的電荷/分子量比是恆定的)。
這在蛋白電泳中(特別是SDS-PAGE中)是一樣的。

⑵ 瓊脂糖凝膠電泳與聚丙烯醯胺凝膠電泳相比,誰的解析度高

dna電泳一般使用的都是瓊脂糖凝膠電泳,電泳的驅動力靠dna骨架本身的負電荷。
蛋白質電泳(一般指sds-page)一般使用的都是聚丙烯醯胺凝膠電泳,電泳的驅動力靠與蛋白質結合的sds上所攜帶的負電荷。
所以相同點就是樣品都是帶負電荷的,從負極向正極移動,移動的距離都和樣品的分子量有關。而且這兩個電泳體系可以互相交換使用。進行大分子蛋白質電泳時,可以考慮換用瓊脂糖凝膠,因為該體系孔徑大。相反,如果需要精確到各位數鹼基的dna電泳也可以使用聚丙烯醯胺凝膠系統,因為使用該系統可以將相差一個鹼基的兩條dna鏈分開。
不同點首先是樣品不同。這個就不用多說了。其次是結果的觀察方法不同。dna電泳普遍使用eb做染料,在紫外燈下觀察;而蛋白電泳使用的考馬斯亮藍染色,還需要經過脫色步驟,不過觀察起來比較簡單。還有就是膠體系的差別,dna電泳通常是一膠跑到底,而蛋白質電泳則會有分離膠和濃縮膠之區別。
電泳中樣品移動的本質確實是樣品所攜帶的電荷。但是,區分這些條帶直接可以用分子量而無需使用電荷數,是因為這些樣品的電荷/分子量比都是恆定的了。以dna分子為例,它在電泳中的移動是靠其骨架中磷酸所攜帶的負電荷來實現的,而這個磷酸分子又是每一個核苷酸中都有的,所以dna分子所攜帶的負電荷數是由其核苷酸總數決定的。而且,dna分子中核苷酸的組成動輒成百上千,在如此大的分子量面前,討論單個核苷酸之間分子量的差別就顯得毫無意義。這樣,dna分子中負電荷的量就可以用dna的分子量來代替,反過來,dna的分子量也就可以用dna分子所攜帶的電荷來代替(一句話,dna分子的電荷/分子量比是恆定的)。
這在蛋白電泳中(特別是sds-page中)是一樣的。在sds-page中,sds將蛋白質變性成直線分子並緊密包裹於其上,使得其所攜帶的電荷與蛋白分子量成了一定的比例,剩下的就和核酸電泳一樣了。

⑶ 瓊脂糖凝膠怎麼配製

把瓊脂糖,即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂,溶於熱水,倒入玻璃杯中,冷卻製成的凝膠。融化後在37°C下可維持液態數小時,30°C時凝固成膠。即完成瓊脂糖凝膠的配置。

製成的小顆粒用於凝膠過濾,適於用sephadex不能分級分離的大分子的凝膠過濾,若使用5%以下濃度的凝膠,也能夠分級分離細胞顆粒、病毒等。利用其吸附性小的特點,有時用它代替瓊脂、以作為免疫電泳或凝膠內沉降反應的支持物。

(3)瓊脂糖樹脂孔徑擴展閱讀:

瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經化學修飾後熔點降低的低熔點瓊脂糖,瓊脂糖的熔點在62〜65°C之間,多用於對染色體DNA在凝膠內進行原位酶切及DNA片段回收。瓊脂糖凝膠由於孔徑大常用於大分子蛋白質、DNA的分離。

瓊脂由瓊脂糖和瓊脂果膠兩部分組成:

作為膠凝劑的瓊脂糖是不含硫酸酯的非離子型多糖,是形成凝膠的組分,其大分子鏈鏈節著1,3苷鍵交替相連的β-D-半乳糖殘基和3,6-內醚-L-半乳糖殘基 。而瓊脂果膠是非凝膠部分,是帶有硫酸酯、葡萄糖醛酸和丙酮酸醛的復雜多糖,也是商業提取中力圖去掉的部分。

商品瓊脂一般帶有2%~7%的硫酸酯,0%~3%的丙酮酸醛及1%~3%的甲乙基。在工業上的瓊脂 色澤由白到微黃,具有膠質感,無氣味或有輕微的特徵性氣味,瓊脂不溶於冷水,易溶於沸水。

瓊脂系選用優質天然石花菜、江蘺菜、紫菜等海藻為原料,採用科學方法精煉提純的天然高分子多糖物質。

瓊脂為親水性膠體,分有條狀和粉末狀,不溶於冷水,易溶於熱水。瓊脂在工業上具有獨特的重要性,瓊脂的濃度即使低至1%仍能形成相當穩定的凝膠,是食品工業、化學工業、醫學科研所必需之原料。

⑷ 瓊脂糖電泳有何優缺點

瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。對於分子量較大的樣品,如大分子核酸、病毒等,一般可採用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。
瓊脂糖凝膠約可區分相差100bp的DNA片段,其解析度雖比聚丙烯醯胺凝膠低,但它制備容易,分離范圍廣,尤其適於分離大片段DNA。普通瓊脂糖凝膠分離DNA的范圍為0.2-20kb,利用脈沖電泳,可分離高達10^7bp的DNA片段。
瓊脂糖凝膠的特點
天然瓊脂(agar)是一種多聚糖,主要由瓊脂糖(agarose,約佔80%)及瓊脂膠(agaropectin)組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質,不帶電荷,而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖,由於這些基團帶有電荷,在電場作用下能產生較強的電滲現象,加之硫酸根可與某些蛋白質作用而影響電泳速度及分離效果。因此,目前多用瓊脂糖為電泳支持物進行平板電泳,其優點如下。
(1)瓊脂糖凝膠電泳操作簡單,電泳速度快,樣品不需事先處理就可以進行電泳。
(2)瓊脂糖凝膠結構均勻,含水量大(約佔98%~99%),近似自由電泳,樣品擴散較自由電流,對樣品吸附極微,因此電泳圖譜清晰,解析度高,重復性好。
(3)瓊脂糖透明無紫外吸收,電泳過程和結果可直接用紫外光燈檢測及定量測定。
(4)電泳後區帶易染色,樣品極易洗脫,便於定量測定。製成干膜可長期保存。
目前,常用瓊脂糖作為電泳支持物,分離蛋白質和同工酶。將瓊脂糖電泳與免疫化學相結合,發展成免疫電泳技術,能鑒別其他方法不能鑒別的復雜體系,由於建立了超微量技術,0.1ug蛋白質就可檢出。

⑸ 2,比較瓊脂糖電泳和聚丙烯醯胺電泳的異同

DNA電泳常用的支持介質有瓊脂糖凝膠和聚丙烯醯胺凝膠.
瓊脂糖凝膠的凝膠孔徑大,適合大分子DNA電泳和需要快速簡單分析的DNA電泳,電泳方式一般採用水平潛水電泳。優點是快速簡單,但解析度不是很高,對於差異較小的 DNA片段難以分辨。
聚丙烯醯胺凝膠電泳適宜分離鑒定低分子量蛋白質、小於1Kb的DNA片段和DNA序列分析.其裝載的樣品量大,回收DNA純度高.長度僅相差0.2%(即500bp中的1bp)的核苷酸分子即能分離.

一般說來,分離鑒定小於1000個核苷酸的核酸片段可用聚丙烯醯胺電泳,分離鑒定0.1-50kb的DNA片段可用恆場常規瓊脂糖電泳,而分離鑒定大於50kb的
DNA片段則需採用脈沖場瓊脂糖電泳。

⑹ 瓊脂糖凝膠電泳具體操作步驟是什麼需要注意什麼事項

一、操作步驟:

1、電泳方法

一般的核酸檢測只需要瓊脂糖凝膠電泳就可以;如果需要解析度高的電泳,特別是只有幾個bp的差別應該選擇聚丙烯醯胺凝膠電泳;用普通電泳不合適的巨大DNA鏈應該使用脈沖凝膠電泳。

2、凝膠濃度

對於瓊脂糖凝膠電泳,濃度通常在0.5~2%之間,低濃度的用來進行大片段核酸的電泳,高濃度的用來進行小片段分析。低濃度膠易碎,小心操作和使用質量好的瓊脂糖是解決辦法。

3、緩沖液

常用的緩沖液有TAE和TBE,而TBE比TAE有著更好的緩沖能力。電泳時使用新制的緩沖液可以明顯提高電泳效果。

4、電壓和溫度

電泳時電場強度不應該超過20V/cm,電泳溫度應該低於30℃,對於巨大的DNA電泳,溫度應該低於15℃。

5、DNA樣品的純度和狀態

注意樣品中含鹽量太高和含雜質蛋白均可以產生條帶模糊和條帶缺失的現象。乙醇沉澱可以去除多餘的鹽,用酚可以去除蛋白。

6、DNA的上樣

正確的DNA上樣量是條帶清晰的保證。注意太多的DNA上樣量可能導致DNA帶型模糊,而太小的DNA上樣量則導致帶信號弱甚至缺失。

7、Marker的選擇

DNA電泳一定要使用DNA Marker或已知大小的正對照DNA來估計DNA片段大小。Marker應該選擇在目標片段大小附近ladder較密的,這樣對目標片段大小的估計才比較准確。

8、凝膠的染色和觀察

實驗室常用的核酸染色劑是溴化乙錠(EB),染色效果好,操作方便,但是穩定性差,具有毒性。注意觀察凝膠時應根據染料不同使用合適的光源和激發波長,如果激發波長不對,條帶則不易觀察,出現條帶模糊的現象。

二、注意事項:

1、巨大的DNA鏈用普通電泳可能跑不出膠孔導致缺帶。

2、高濃度的膠可能使分子大小相近的DNA帶不易分辨,造成條帶缺失現象。

3、電泳緩沖液多次使用後,離子強度降低,pH值上升,緩沖性能下降,可能使DNA電泳產生條帶模糊和不規則的DNA帶遷移的現象。

4、如果電泳時電壓和溫度過高,可能導致出現條帶模糊和不規則的DNA帶遷移的現象。特別是電壓太大可能導致小片段跑出膠而出現缺帶現象。

5、變性的DNA樣品可能導致條帶模糊和缺失,也可能出現不規則的DNA條帶遷移。在上樣前不要對DNA樣品加熱,用20mM NaCl緩沖液稀釋可以防止DNA變性。

6、太多的DNA上樣量可能導致DNA帶型模糊,而太小的DNA上樣量則導致帶信號弱甚至缺失。

(6)瓊脂糖樹脂孔徑擴展閱讀

瓊脂糖凝膠具有網路結構,物質分子通過時會受到阻力,大分子物質在涌動時受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決於凈電荷的性質和數量,而且還取決於分子大小,這就大大提高了分辨能力。

但由於其孔徑相比於蛋白質太大,對大多數蛋白質來說其分子篩效應微不足道,現廣泛應用於核酸的研究中。

蛋白質和核酸會根據pH不同帶有不同電荷,在電場中受力大小不同,因此跑的速度不同,根據這個原理可將其分開。電泳緩沖液的pH在6~9之間,離子強度0.02~0.05為最適。常用1%的瓊脂糖作為電泳支持物。

瓊脂糖凝膠約可區分相差100bp的DNA片段,其解析度雖比聚丙烯醯胺凝膠低,但它制備容易,分離范圍廣。普通瓊脂糖凝膠分離DNA的范圍為0.2-20kb,利用脈沖電泳,可分離高達10^7bp的DNA片段。

DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時有電荷效應和分子篩效應。DNA分子在高於等電點的pH溶液中帶負電荷,在電場中向正極移動。由於糖-磷酸骨架在結構上的重復性質,相同數量的雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷,因此它們能以同樣的速率向正極方向移動。

⑺ 瓊脂糖甲醛變性凝膠電泳

5月25日 09:54 瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖是從瓊脂中提純出來的,主要是由D-半乳糖和3,6脫水L-半乳糖連接而成的一種線性多糖。瓊脂糖凝膠的製作是將乾的瓊脂糖懸浮於緩沖液中,通常使用的濃度是1%-3%,加熱煮沸至溶液變為澄清,注入模板後室溫下冷卻凝聚即成瓊脂糖凝膠。瓊脂糖之間以分子內和分子間氫鍵形成較為穩定的交聯結構,這種交聯的結構使瓊脂糖凝膠有較好的抗對流性質。瓊脂糖凝膠的孔徑可以通過瓊脂糖的最初濃度來控制,低濃度的瓊脂糖形成較大的孔徑,而高濃度的瓊脂糖形成較小的孔徑。盡管瓊脂糖本身沒有電荷,但一些糖基可能會被羧基、甲氧基特別是硫酸根不同程度的取代,使得瓊脂糖凝膠表面帶有一定的電荷,引起電泳過程中發生電滲以及樣品和凝膠間的靜電相互作用,影響分離效果。市售的瓊脂糖有不同的提純等級,主要以硫酸根的含量為指標,硫酸根的含量越少,提純等級越高。
瓊脂糖凝膠可以用於蛋白質和核酸的電泳支持介質,尤其適合於核酸的提純、分析。如濃度為1%的瓊脂糖凝膠的孔徑對於蛋白質來說是比較大的,對蛋白質的阻礙作用較小,這時蛋白質分子大小對電泳遷移率的影響相對較小,所以適用於一些忽略蛋白質大小而只根據蛋白質天然電荷來進行分離的電泳技術,如免疫電泳、平板等電聚焦電泳等。瓊脂糖也適合於DNA、RNA分子的分離、分析,由於DNA、RNA分子通常較大,所以在分離過程中會存在一定的摩擦阻礙作用,這時分子的大小會對電泳遷移率產生明顯影響。例如對於雙鏈DNA,電泳遷移率的大小主要與DNA分子大小有關,而與鹼基排列及組成無關。另外,一些低熔點的瓊脂糖(62 ~ 65 °C)可以在65 °C時熔化,因此其中的樣品如DNA可以重新溶解到溶液中而回收。
由於瓊脂糖凝膠的彈性較差,難以從小管中取出,所以一般瓊脂糖凝膠不適合於管狀電泳,管狀電泳通常採用聚丙烯醯胺凝膠。瓊脂糖凝膠通常是形成水平式板狀凝膠,用於等電聚焦、免疫電泳等蛋白質電泳,以及DNA、RNA的分析。垂直式電泳應用得相對較少。
簡單介紹一個關於瓊脂糖凝膠電泳的實驗
CK同工酶的測定
標本採集、處理和貯存
CK同工酶檢測血清和血漿均可。在4℃可保存數天,-15℃可保存2周,若用血漿宜用EGTA,而不用EDTA抗凝。冷凍血漿測定時,應在30℃以下融化,需反復冰融者應加還原劑——巰基乙醇以穩定酶活性,速凍及貯存於-20℃或-70℃,在有β-巰基乙醇和EGTA存在時,MM和MB可穩定數年,而BB則僅穩定半年。由於CK同工酶半衰期短,故酶活性的高低受標本採集時間的影響較大。
瓊脂糖凝膠電泳法
1.原理
CK分子是由M和B兩種亞單位組成的二聚體,在電泳條件下,CK-BB遷移最快,CK-MB居中,CK-MM最慢。電泳後進行酶促反應顯色,觀察結果。顯色原理是:CK催化磷酸肌酸(CrP)及ADP,產生肌酸(Cr)及ATP,在偶聯的HK催化下葡萄糖被ATP磷酸化,形成G-6-P;在偶聯的G-6-PD催化下G-6-P被NADP+氧化,形成6-P-G,同時NADP+還原為NADPH。在365nm觀察NADPH的熒光或用熒光光密度計掃描定量。也可用四氮唑鹽顯色法,即利用酚嗪二甲酯硫酸鹽(PMS)將NADPH的氫傳遞給氯化碘代硝基四唑(INT),使其還原成紫紅色的甲鐟,顯示CK同工酶區帶。
2.試劑
① 50mmol/L Tris-巴比妥緩沖液(pH8.0):稱取巴比妥6.716g,Tris 1.905g,溶於蒸餾水中並稀釋到1L,電泳用。
② 30mmol/L Tris-巴比妥緩沖液(pH8.6):稱取巴比妥1.21g,Tris 1.15g,以蒸餾水溶解並稀釋到500mL。
③ 5g/L瓊脂糖[內含14g/L聚乙烯吡咯烷酮(PVP)]:稱取0.5g瓊脂糖,1.4gPVP,加試劑「②」100mL隔水煮沸溶解,分裝後4℃保存。
④ 400mmol/L Bis-Tris緩沖液(內含20mmol/L醋酸鎂、4mmol/L EDTA),pH7.0:稱取Bis-Tris 8.36g,EDTA Na2•2H2O 0.149g,加蒸餾水95ml溶解,用lmol/L醋酸調至pH7.0後,稱取醋酸鎂(含4分子水)0.429g,加入,用蒸餾水稀釋到100mL。4'C保存可用2個月,-20℃保存可用6個月。
⑤ 輔酶溶液(ADP 4mmol/L,AMP10mmol/L,NADP+4mmol/L,葡萄糖40mmol/L):稱取ADP 17.1mg,AMP36.5mg,NADP+29.7mg,葡萄糖72.1mg,加試劑「④」9mL平衡至25℃後,用lmol/L醋酸調pH至6.4(約用lml),在4℃保存可用半個月。
⑥ 底物顯色液甲(按兩張載玻片計):用前於甲管中加試劑「⑤」1.5mL,己糖激酶10.5 U,葡萄糖-6-磷酸脫氫酶6 U。混合後置37℃水浴5min,加入PMS 0.02mg(2g/LPMS 0.01m1)。PMS須避光。在加PMS前的5min內配好底物顯色液乙,加PMS後,立即與乙液混合並覆蓋於電泳凝膠板上。
⑦ 底物顯色液乙:先配製下列試劑;
A. 450mmol幾磷酸肌酸:存4℃可用3個月。
B. 5g/L氯化碘代硝基四唑:置棕色瓶貯存,4℃可用3個月。
C. 12.5g/L瓊脂糖(含62.5mmol/L氯化鈉及35g/L聚乙烯吡咯烷酮):稱取1.25g瓊脂糖,加入100mL蒸餾水,隔水煮沸溶解後,再加入氯化鈉262.5mg及聚乙烯毗咯烷酮3.5g,溶解後分裝,置4℃保存。
用前於乙管中加入「A」液0.2mL,「B」0.2mL,置37℃水浴2min後,加入N-乙醯半胱氨酸(NAC)20mg,或還原型谷胱甘肽10mg。用預溫至37℃的滴管吸人,隔水煮沸融化後,溫度降至37~43℃(在37~43℃的水浴箱中平衡)的「C」液1.2mL,滴管吹吸混合,使NAC溶解。
⑧ 混合底物顯色液:當乙液配成後,立即吸甲液入乙液中,混合後立即使用。在水浴箱中操作,防止瓊脂糖凝固。必要時用0.2mL蒸餾水代磷酸肌酸溶液制備對照顯色液。如作熒光法,用不含PMS及INT的甲、乙液,用蒸餾水代INT溶液。
3.操作
(1)隔水煮沸溶解試劑「③」,取1.5mL鋪於1~1.2mm厚的載玻片上。於近陰極端並行挖兩個槽,作兩份標本,或作標本與控制物。
(2)加樣5μL,80V電泳50min。
(3)合理安排配製混合底物顯色液的時間,使配製完成時電泳結束。
(4)將電泳凝膠板置塗以黑漆的鋁盒中,吸底物顯色液1.5mL鋪於凝膠板上,加蓋,待凝後置37 ℃水浴1小時。
(5)置固定液(乙醇:醋酸:水=150:10:40)中2~4小時,轉入蒸餾水中數小時,取出觀察結果或用光密度計在500nm波長下掃描定量。需要時可平推至空白卡片紙上,37℃孵箱過夜,乾片保存。或用無PMS、INT底物顯色液,37℃水箱孵育20min。
(6)再置60℃乾燥箱中20min,在紫外燈(365nm)下觀察熒光。有條件者用熒光光密度計掃描定量,激發波長360nm,發射波長460nm。
4.結果觀察
瓊脂糖凝膠電泳法的結果觀察如圖9-14所示。
5.注意事項
廣泛存在於各種組織的腺苷酸激酶(AK)催化ADP產生ATP,干擾同工酶結果的判斷。加入AMP可抑制此反應,但過量AMP也抑制CK。NaF抑制AK,不抑制CK,與AMP合用可抑制各種AK同工酶的97%。NaF與CK激活劑Mg2+可逐漸形成MgF2沉澱,所以,NaF與Mg2+分開配製,臨時混合,不影響各自的作用。電泳需較高pH,酶反應需較低pH,本法中用低離子強度,pH低於8.6的電泳緩沖液;高離子強度,pH低於6.7的基質緩沖液。當含瓊脂糖的基質顯色劑覆蓋於電泳後的凝膠板,上下凝膠中的成分相互擴散後的pH,恰為酶作用的最適pH。Bis-Tris全名為Bis(2-羥乙基)亞氨基-Tris(羥甲基)甲烷,25℃時pKa=6.46,是CK同工酶。測定優選的緩沖劑,200mmol/L時,CK活力最大。如無Bis-Tris;亦可用咪唑加EDTA作基質緩沖液。EDTA作Ca2+的絡合劑,因Ca2+抑制CK活力。血清CK活力隨溫度升高而增加,直至45℃;更高溫度迅速下降,56℃時很快失活。瓊脂糖電泳法測CK同工酶,絕不能象作LDH同工酶用溫度較高的瓊脂糖基質顯色液,否則CK活力喪失。而非脫氫酶反應(Nothingdehydogenase,NDH)顯著。NDH是相當於白蛋白及β球蛋白區帶處的紫紅色區帶,與蛋白質的巰基有關,標本用量大,pH高時尤其明顯,僅四唑鹽及PMS就可與標本產生,用測NADPH熒光法可避免。本法中標本用量少,顯色時pH較低,NDH反應不明顯。CK是巰基酶,絕對需要巰基試劑活化。但巰基試劑可還原四唑鹽,N-乙醯半胱氨酸及谷胱甘肽還原四唑鹽能力弱,可使背景清晰。PVP是隋性聚合體,作為酶擴散的障礙物加入,可改善區帶分離效果。CK不穩定,對光、熱及高pH敏感,最好將及時分出的血清充C02後塞緊管口,置冰室或-30℃保存,至少可穩定半個月,及時測定更好。不主張加巰基活化劑保存。影響CK同工酶電泳與顯色的因素很多,必須同時作控制物。

附件:新建 Microsoft Word 文檔.doc
該回答在5月25日 09:58由回答者修改過

參考文獻:儀器信息網,http://www.xbmu.e.cn/k

⑻ 博凌科為 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒(離心柱型)可回收的片段大小是多少具有什麼特點

博凌科為 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒(離心柱型)
產品說明:
本試劑盒採用獨特的緩沖液系統,溶膠後轉入吸附柱直接離心即可專一性吸附DNA,去除其它雜質。可從TAE或TBE瓊脂糖凝膠上回收DNA片段。
可回收100bp-40kb大小的片段,回收率可高達85%以上。是最快速高效的選擇。

特點:
◆ 快速:步驟最少,整個操作只需十幾分鍾,可同時處理多個樣品,節省時間。
◆ 高效:100bp-40kb大小的片段均可高效率回收,最高可達85%以上。
◆ 簡便:只需幾次離心即可完成反應,不需晾乾樹脂。

保存:
室溫可保存一年以上。

⑼ 為什麼瓊脂糖膠濃度越大,跑的是片段越小的質粒

一般來說,DNA片段越小,膠的濃度需要大些,原因就是膠的濃度越低,形成的孔徑就越小,這樣才能將各種不同小片段的DNA分離開來,並達到一定的精確度.分子生物學實驗手冊有對應的表格:

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