紙片快速法測廢水糞大腸桿菌

Ⅰ 怎樣用便捷的方法檢測大腸桿菌超標的自來水

檢測原理：
大腸菌群是一群能發酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌，該菌主要來源於人畜糞便，故以此作為糞便污染指標來評價食品的衛生質量，推斷食品中有否污染腸道致病菌的可能。食品中的大腸菌群數系以100ml(g)檢樣內大腸菌群最可能數(MPN)表示。
2.儀器設備與器具：
2.1 恆溫培養箱：36±1℃。
2.2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
2.3 接種針。
2.4 顯微鏡。
2.5 超凈工作台。
2.6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
2.7 天平：感量0.01g。
2.8 滅菌釜。
2.9 培養皿（直徑為90mm）、試管，經121℃、30分鍾滅菌。
2.10試管夾、酒精燈、秒錶、載玻片 3.培養基及試劑：
3.1 乳糖膽鹽發酵管：按照製造廠家使用說明進行配製，滅菌。
3.2 伊紅美蘭瓊脂平板： 按照製造廠家使用說明進行配製，滅菌。
3.3 乳糖發酵管： 按照製造廠家使用說明進行配製，滅菌。
3.4 革蘭氏染色液。
3.4.1 結晶紫染色液：
結晶紫 1g
95%乙醇 20ml
1%草酸銨水溶液 80ml
將結晶紫溶解於乙醇中，然後與草酸銨溶液混合。
3.4.2 革蘭氏碘液：
碘 1g
碘化鉀 2g
蒸餾水 300ml
將碘與碘化鉀先進行混合，加入蒸餾水少許，充分振搖，待完全溶解後，再加蒸餾水至300 ml。
3.4.3 沙黃復染液：
沙黃 0.25g
95%乙醇 10ml
蒸餾水 90ml
將沙黃溶解於乙醇中，然後用蒸餾水稀釋。
3.5 生理鹽水。
4.檢驗程序：
檢樣
↓
稀釋
↓
乳糖膽鹽發酵管，36±1℃，24±2hr

↓ ↓
不產氣 產氣
↓ ↓
大腸菌群陰性 伊紅美蘭瓊脂平板，36±1℃，24±2hr
↓
報告 ↓ ↓
革蘭氏染色 乳糖發酵管，36±1℃，24±2hr
↓
↓ ↓ ↓ ↓
G+ G-，無芽孢桿菌 產氣 不產氣
↓ ↓
大腸菌群陰性 大腸菌群陰性
↓ ↓ ↓
報告 大腸菌群陽性 報告

5.測定方法：
5.1 檢樣稀釋：
5.1.1 以無菌操作將檢樣25ml(或25g)放於含有225ml滅菌生理鹽水的滅菌塑料燒杯中，經充分振搖成1：10均勻稀釋液。
5.1.2 用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，注入含有9ml滅菌生理鹽水的 試管中，振搖成1：100稀釋液。
5.1.3 重復5.1.2的操作，使成1：1000稀釋液。
5.2乳糖膽鹽發酵試驗：根據食品衛生標准要求或對檢樣污染情況的估計，選擇二個稀釋度，每一稀釋度接種3管，接種量在1ml以上者，用雙料乳糖膽鹽發酵管。1ml及1ml以下者，用單料乳糖膽鹽發酵管。然後置於36±1 ℃培
養箱內，培養24±2hr，如所有乳糖膽鹽發酵管都不產氣，則可報告為大腸菌
群陰性；如有產氣者，則可按以下程序進行。
5.3分離培養：將產氣的發酵管分別接種於伊紅美蘭瓊脂平板上，置36±1℃溫箱內，培養24hr後取出，觀察菌落形態，並作革蘭氏染色。
5.4證實試驗：在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落1～2個進行革蘭氏染色同時接種乳糖發酵管，置於36±1℃溫箱內培養24±2hr，觀察產氣情況。乳糖發酵管產氣，革蘭氏染色為陰性的無芽孢桿菌，即可報告為大腸菌群陽性。
5.5報告：根據證實為大腸菌群陽性的管數，查MPN檢索表，報告每100ml(g)大腸菌群的最可能數。

Ⅱ 大腸桿菌快速測定紙片法是什麼類型的濾紙

金標的，，，酶聯一般是2-3小時才能出結果、、46天如果你用的金標的話一般也能排除。如果你還不放心，你可以在過2周後再到的那個地疾控中心復查一次。希望我的回答對你有幫助(手打不容易)

Ⅲ 污水廠中進出水大腸桿菌都是用什麼檢測方法，有沒有簡單的方法

多管發酵法，希望能幫到您

Ⅳ 水中大腸桿菌的檢測方法

大腸菌群測定的操作細則
大腸菌群系指一群能發酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。該菌主要來於人畜糞便,故以此作為糞便污染指標來評價食品的衛生質量,推斷食品中有否污染腸道致病菌的可能。
食品中大腸菌群數系以100ml(g)檢樣內大腸菌群最可能數(mpn)表示。
1
設備和材料
1.1
溫箱：36±1℃。
1.2
冰箱:0～4℃。
1.3
恆溫水浴
:44.5±0.5℃。
1.4
天平。
1.5
顯微鏡。
1.6
均質器或乳缽。
1.7
平皿:直徑為90mm。
1.8
試管。
1.9
吸管。
1.10
廣口瓶或三角燒瓶:容量為500ml。
1.11
玻璃珠:直徑約5mm。
1.12
載玻片。
1.13
酒精燈。
1.14
試管架。
2
培養基和試劑
2.1
乳糖膽鹽發酵管:按gb
4789.28中4.9規定。
2.2
伊紅美藍瓊脂平板:按gb
4789.28中4.25規定。
2.3
乳糖發酵管:按gb
4789.28中4.10規定。
2.4
ec
肉湯:按gb
4789.28中4.11規定。
2.5
磷酸鹽緩沖稀釋液:按gb
4789.28中3.22規定。
2.6
生理鹽水。
2.7
革蘭氏染色液:按gb
4789.28中2.2規定。
3
操作步驟
3.1
檢樣稀釋
3.1.1
以無菌操作將檢樣25ml(或g)放於有225ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(瓶內予置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內,經充分振搖或研磨做成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣最好用均質器,以8
000-10
000
r/min的速度處理1min,做成1:10的均勻稀釋液。
3.1.2
用1ml滅菌吸管吸取1:10稀釋液1ml,注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內,振搖試管混勻,做成1:100的稀釋液。
3.1.3
另取1ml滅菌吸管,按上條操作依次做10倍遞增稀釋液,每遞增稀釋一次,換用1支1ml滅菌吸管。
3.1.4
根據食品衛生標准要求或對檢樣污染情況的估計,選擇三個稀釋度,每個稀釋度,接種3管。
3.2
乳糖發酵試驗
將待檢樣品接種於乳糖
膽鹽發酵管內,接種量在1ml以上者,用雙料乳糖膽鹽發酵管,1ml及1ml以下者,用單料乳糖膽鹽發酵管。每一稀釋度接種3管,置36±1℃
溫箱內,培養24±2h,如所有乳糖膽鹽發酵管都不產氣,則可報告為大腸菌群陰性,如有產氣者,則按下列程序進行。
3.3
分離培養
將產氣的發酵管分別轉種在伊紅美藍瓊脂平板上,置36±1℃
溫箱內,培養18-24h,然後取出,觀察菌落形態,並做革蘭氏染色和證實試驗。
3.4
證實試驗
在上述平板上,挑取可疑大腸菌群菌落1-2個進行革蘭氏染色,同時接種乳糖發酵管,置
36±1℃溫箱內培養24±2h,觀察產氣情況。凡乳糖管產氣、革蘭氏染色為陰性的無芽胞桿菌,即可報告為大腸菌群陽性。
3.5
報告
根據證實為大腸菌群陽性的管數,查mpn檢索表,報告每100ml(g)大腸菌群的mpn值。
4
糞大腸菌群(faecal
coliform)
4.1
用接種環將所有產氣的乳糖膽鹽發酵管培養物(見3.2條)轉種於ec肉湯管內,置44.5±0.2℃水浴箱內(水浴箱內的水面應高於ec肉湯液面),培養24±2h,經培養後,如所有ec肉湯管均不產氣,則可報告為陰性;如有產氣者,則將所有產氣的ec肉湯管分別轉種於伊紅美藍瓊脂平板上,置
培養18-24h,凡平板上有典型菌落者,則證實為糞大腸菌群陽性。
4.2
結果報告
根據證實為糞大腸菌群的陽性管數,查mpn檢索表,報告每100ml(g)糞大腸菌群的mpn值。

Ⅳ 污泥裡面的糞大腸桿菌怎麼測

取一定量的污泥，進行微生物培養，觀察菌落數，菌落的數量就是改量的污泥中的大腸桿菌數量，不過需要多個平行性實驗，確保准確性

Ⅵ 關於水中糞大腸菌群數的測定

1.管的規劃不定，最好是帶蓋子的10－50ml的玻璃管，一般要最少做5個平行。
2.培養基都可以自己配的，建議用簡單的lb培養基即可，葯品為蛋白腖和nacl（固體用agar）。
3.塞子或蓋子都可以，但一定要加。
4.需要超凈台、高壓滅菌鍋、調溫搖床這些必備儀器。
糞大腸菌群是生長於人和溫血動物腸道中的一組腸道細菌，隨糞便排出體外，約占糞便乾重的1／3以上，故稱為糞大腸菌群。糞大腸菌群不是細菌學上分類命名，而是根據衛生學方面的需要，而設定的一類與糞便污染有關的一組細菌，是能在44.5℃24h內發酵乳糖產酸產氣的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。糞大腸菌群為一群需氧及兼性厭氧的菌群，呈革蘭氏陰性反應，能在普通培養基上生長繁殖；其生化活動能力較強，能發酵多種糖類，產酸產氣，其特點是能較快發酵乳糖，糞大腸菌群在乳糖培養基中於．37℃下進行培養，在24h內能使乳糖發酵產酸，還有甲酸解氫酶進行分解甲酸，生成氫氣和二氧化碳，產生大量氣體，這時，若加入伊紅美蘭指示劑，分解乳糖所產生的酸(帶陽電荷)與伊紅相染呈紫色且有金屬光澤，故常用此特性來鑒定識別糞大腸菌群。
具體操作如下：
(1)發酵(產酸產氣)試驗
將試樣液以無菌接種於雙倍乳糖膽鹽發酵管(其內放有倒置的小玻璃管，以收集氣體)內，置44'e培養箱中培養24—48h，由於乳糖膽鹽培養基是一種具有選擇作用的培養基，其中膽鹽具有抑製革蘭氏陽性菌的作用，若觀察到發酵管內不產酸(有酚紅指示劑指示)不產氣，則報告試樣為糞大腸菌群陰性，未檢出，檢測結束。
若發酵管內產酸產氣，則繼續進行下列檢測。
(2)鑒別培養
將有產酸產氣的發酵管內試樣培養液接種到伊紅美蘭瓊脂培養基平皿上，置37℃培養18～24h；同時將該培養液接種到蛋白腖水中，置44℃培養24h。
(3)驗證實驗
菌落觀察：在上述平皿培養基上，仔細觀察菌落生長情況：大腸菌群在伊紅美蘭瓊脂培養基上其典型菌落是呈深紫色、圓形、邊緣整齊、表面光滑、濕潤、常具有金屬光澤，或呈紫黑色不帶或略帶金屬光澤及粉紫色，中心較深的菌落。
革蘭氏染色、鏡檢：將以上典型的(或近似的)大腸菌群菌落進行革蘭氏染色、鏡檢，若革蘭氏染色呈陽性(紫色)反應，則報告糞大腸菌群呈陰性，未檢出。若革蘭氏染色呈陰性，檢測還需進行下一試驗，以待進一步證實。
靛基質試驗(吲哚試驗)：對前已培養好的蛋白腖水中，滴人靛基質試劑(對二甲基氨基苯甲醛試劑)，進行靛基質反應，若液面呈玫瑰紅色，呈陽性反應，則報告糞大腸菌群呈陽性，檢出；若液面仍是棕黃色，則報告糞大腸菌群呈陰性，未檢出。
(4)檢測程序
將上述檢測糞大腸菌群的操作步驟可歸結為以下程序圖示。
(5)檢驗報告
當發酵管內產酸產氣，觀察試液平皿上為典型糞大腸菌群菌落，並經革蘭氏染色、檢鏡試驗為陰性(—)及靛基質試驗為陽性，則報告該試液經檢測檢出糞大腸菌群。其他結果均為未檢出糞大腸菌群。

Ⅶ 糞大腸菌群紙片法 要求化驗室達到什麼標准

糞大腸菌群是生長於人和溫血動物腸道中的一組腸道細菌,隨糞便排出體外,約占糞便乾重的1/3以上,故稱為糞大腸菌群。受糞便污染的水、食品、化妝品和土壤等物質均含有大量的這類菌群。若檢出糞大腸菌群即表明已被糞便污染。
大腸菌群並非細菌學分類命名，而是衛生細菌領域的用語，它不代表某一個或某一屬細菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌，需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產酸產氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。 腸埃希氏菌(E. coli)通常稱為大腸桿菌，根據不同的生物學特性將致病性大腸桿菌分為5類：致病性大腸桿菌(EPEC)、腸產毒性大腸桿菌(ETEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)。 糞大腸菌群是大腸菌群的一種，又名耐熱大腸菌群，糞大腸菌群是生長於人和溫血動物腸道中的一組腸道細菌,隨糞便排出體外,約占糞便乾重的1/3以上,故稱為糞大腸菌群。

Ⅷ 我正在做糞大腸桿菌的檢測實驗，做了兩次了！為什麼總是沒有氣泡和顏色變黃！到底是什麼原因呢！求高人指

首先，確定你檢測的樣品含有糞大腸，沒有是不能變黃的。
如果是額外添加的，你要確保你的糞大腸是否有活性。
在稀釋時，你要確保稀釋度要合理，稀釋倍數過高，也不會變黃。
還有就是糞大腸的檢測已經不用乳糖膽鹽發酵培養基了。

Ⅸ 如何快速殺死污水中的糞大腸菌群

怎麼認定還真難說，應該是檢測病毒的數量，但肯定不是根據大腸桿菌來定，廢水中都含有不同數量的大腸桿菌，不如生活污水。但生活污水並非含病原體污水。

Ⅹ 水中糞大腸菌群的測定

化妝品檢測項目中糞大腸菌群的檢測流程：
10g/mL樣品+90mL滅菌生理鹽水 →10mL+10mL雙倍乳糖膽（含中和劑）培養基→糞大腸菌群 44.5℃，48h培養
註：在化妝品檢測項目中，如果樣品含有油脂性的成分，如精油，在樣品前處理中需加入液體石蠟、吐溫80、生理鹽水進行均質，使樣品能夠均勻分散開來。
糞大腸菌群又是一個什麼樣的微生物呢？下面我們來詳細介紹下：
大腸菌群：大腸菌群並非細菌學分類命名，而是衛生細菌領域的用語，它不代表某一個或某一屬細菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌，這些細菌在生化及血清學方面並非完全一致。
定義（GB2010）：在一定培養條件下能發酵乳糖、產酸產氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽孢桿菌。
糞大腸菌群：大腸菌群的一種，又稱耐熱大腸菌群，培養溫度：44.5±0.5℃，糞大腸菌群是化妝品檢測項目中必檢的微生物項目。
大腸埃希氏菌：（(Escherichia. coli )通常稱為大腸桿菌。根據不同的生物學特性將致病性大腸桿菌分為5類：
致病性大腸桿菌(EPEC)、
腸產毒性大腸桿菌(ETEC)、
腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、
腸出血性大腸桿菌(EHEC)、
腸黏附性大腸桿菌(EAEC)。
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