c18柱进纯水样品吗
⑴ 液相色谱C18柱堵塞后如何冲洗柱子,能用纯水 冲柱子吗
C18柱子抄不能用纯水冲洗,再说本来就堵了,压力很高应该选择压力低的溶剂。
如果你确定是堵塞了,就用纯乙腈反冲,先用低一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过1.的流速,如果是真的堵了,可能会压力慢慢降下来的。
如果上面方法不行,那还有可能是盐析堵的,那就用乙腈:水=90:10反冲。
⑵ 为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗
容易引起疏水坍塌,把强保留物质冲出来,会毁了柱子的,所以水相不能超过95%,最开始的梯度淋洗也是高有机相到高水相,但是不是纯水相。
⑶ 那些HPLC色谱柱可以用纯水
你问的应该是反相色谱柱,因为凝胶过滤用纯水相是司空见惯的。
Agilent的Bonus系列,专Aichorm的Aqua系列,都是可以做纯水属相的。
但你如果只是考虑梯度起点的高水相比例,那就不必了,普通的C18、C8都可以用纯水相短时间冲洗,不超过10个柱体积,是没什么问题的。
⑷ 碳十八色谱柱能进水吗
可以。不知道你说的“进水”是用水做流动相还是用水作为样品,不过都是可以的。
C18是最常见的反相色谱柱。反相的色谱柱都是可以用水作为流动相的。
不过一般来说,至少要有10%的有机相,也就是流动相里最好加入至少10%的甲醇或者乙腈。也有色谱柱的厂家说可以耐受100%的纯水相,不过如果用100%的水作为流动相,对色谱柱和的损伤有点大,会减少寿命。
样品进水溶液就更没有问题了,流动相那么大体积的水溶液都可以进柱子,进样不过几微升的体积而已,当然也是可以的。
⑸ 用0.3%的冰乙酸水进HPLC C18色谱柱,对柱子有影响吗
如果所用色谱柱能耐酸和纯水,应该没有问题,但通常情况下,会加入一定量的有机相,如甲醇、乙腈等。
⑹ 在冲洗高效液相C18反相柱的时候,为什么不能用纯水
相C18色谱柱(即憎水柱子)如果用纯水冲洗后,如果立即停泵则由于其憎水(疏水)专的缘故使得柱子内属的水因而流失掉,长时间停泵使得柱子干掉(变干),会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷(也说成是失去支撑倒下),柱子就这样报废了。那么一旦冲洗柱子用了纯水相怎么办呢?诶!不要惊慌,只要你不停泵,上述情况不会立即发生,我们只要保证最后用有机相冲洗柱子,停泵后使柱子内留存的是有机相,就无大碍,
⑺ 老师,我做液相的,昨晚Agilent XDB C18的柱子被我用水冲了40分钟,有什么解救方法
你好,咱们C18的柱子一般是不能走纯水的,40min水应该还不是很严重,你用纯甲回醇低流速答冲色谱柱2小时,进样一个以前走过的物质,看看柱效情况。如果不理想了,进一针二氯甲烷,再用甲醇冲。冲完后,在进样看看。
⑻ 离子色谱柱能用纯水冲洗吗,这样是否会影响柱子的性能。
按看说明书或咨询色谱柱厂商,防止损害色谱柱,离子柱都不便宜,小心为上。
用纯水短时间内冲洗色谱柱,通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则
可能引起固定相流失和相塌陷现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定
量的甲醇或乙腈进行冲洗,通常水的含量<90%不会对色谱柱造成任何影响。
原因分析:
首先,由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质,硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一
定浓度有机溶剂的流动相中要大得多,所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,对于常规的 C18 柱而言,由于C18 长链与水是不互溶的,C18 长链之间的相互作用力大于
C18 与水分子的作用力,长时间的用水冲洗,使得C18 长链之间相互靠近,水流的冲刷,导致相互联结
的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面,对疏水性物质的保留能力下降,即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出
现相塌陷的现象,有些厂家推出了纯水柱(如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱),这种纯水柱可以用纯
水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。
第三,如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱,用纯水冲洗,并一定能将缓冲盐完全洗去。因为,由
于缓冲盐难溶于有机溶剂,C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链,相当于一
个疏水的有机相,而硅胶基体被有机物质包裹着,所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易
到达硅胶基质,不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂,而且这些有机溶剂与C18
长链是互溶的,因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力,能使部分缓冲盐达到硅胶基质。
同样的道理,用纯水冲洗只能洗掉表面的缓冲盐,而渗入深处的缓冲盐则仍然残留在那里。所以最好在
水中加入部分有机溶剂进行冲洗,一般的C18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要视分析
时使用的流动相来定,原则上,用于冲洗的流动相中水的比例应该等于或高于(缓冲盐用后清洗的情况,
推荐使用“等于”)分析时所用流动相中水的比例。
⑼ 怎样判断柱子进气泡了我用C18 4.6x250mm 5um 的柱子走样品,发现第二天甲醇跑干了,柱子会不会进气泡
我们用的HPLC是Agilent1100,1200,1220,如果流动相低于0.2L,泵会自动停,你的甲醇跑干了,柱子应该是进了回气泡的。判断答柱子进气泡的方法,你可以通过看柱压,如果只用流动相冲柱子,但是柱压很不稳定,那柱子就是进气泡了
⑽ 离子色谱柱能用纯水冲洗吗
离子色谱柱能用纯水冲洗
按看说明书或咨询色谱柱厂商,防止损害色谱柱,专离子柱都不便宜,属小心为上。
用纯水短时间内冲洗色谱柱,通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则
可能引起固定相流失和相塌陷现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定
量的甲醇或乙腈进行冲洗,通常水的含量<90%不会对色谱柱造成任何影响。