组氨酸离子交换层析

Ⅰ 层析为几大类各自的特点和用途是什么

层析技术的分类
(1) 按流动相的状态分类：用液体作为流动相的称为液相层析，或称液相色谱；以气体作为流动相的称为气相层析，或称气相色谱。
(2) 按固定相的使用形式分类：可分为柱层析(固定相填装在玻璃或不锈钢管中构成层析柱) 、纸层析、薄层层析、薄膜层析等。
(3) 按分离过程所主要依据的物理化学原理分类：可分为吸附层析、分配层析、离子交换层析、分子排阻层析、亲和层析等。

Ⅱ 离子交换层析分离氨基酸时，（苯乙烯磺酸钠）为什么组氨酸后洗脱出来而赖氨酸先洗脱出来

你们是不是这样分析的：组氨酸的PI是7.59，赖氨酸是9.74，这证明赖氨酸碱性更强，酸性更弱，而内用H+洗脱时，先洗脱是应容该是酸性弱的物质所以赖氨酸应该先洗脱下来？
或许可以这样解释：碱性氨基酸和阳离子交换树脂的结合是以氢离子为媒介，借助氢键的极性连接起来的。如果我没记错的话，伯氨基形成的氢键要比仲氨基形成的氢键强一些。
不管用是钠型的还是氢型的阳离子交换树脂，组氨酸和赖氨酸要与其吸附都必需通过氢离子。钠型的阳离子交换树脂并是不所有的磺酸基都与钠离子结合的。你用平衡常数算一下。而且，你用来溶解氨基酸的溶液是强碱性的吗？你的树脂是再生的吗？

Ⅲ 谁有2010生物联赛遗传解析。。。跪求

2010全国中学生生物学联赛试卷及答案

注意事项：

1．使用28铅笔在机读卡上做答；

2．试题按学科分类，单选与多选混排，每小题只标明分值，分值不代表是否为多选，是否多选可从题干中判断。答案完全正确才可得分：

3．答题时间120分钟，全卷共l20道题l60分。

第一部分29道题(40分)

1．在细胞质膜的组成中，胆固醇分子 (1分)

A．仅存在于高等动物细胞中 B．仪存在于高等植物细胞中

C．高等动植物细胞中都存在 D．还未确定

2．细胞质膜上具备的钠钾泵每消耗一一个ATP分子将会 (1分)

A．向细胞内转入2个K+向细胞外转出2个Na+

B．向细胞内转入2个Na+向细胞外转出2个K+

C．向细胞内转入3个K+向细胞外转出2个Na+

D．向细胞内转入2个K+向细胞外转出3个Na+

3．构成溶酶体的各种酶完成合成最终是在那一个部位 (1分)

A．在游离核糖体上

B．在粗面内质网的核糖体上

C．同时在游离和粗面内质网核糖体上

D．在这两种核糖体上轮流进行

【在粗面内质网上合成的蛋白是属于外排蛋白，细胞质基质内游离核糖体合成胞内蛋白。但溶酶体它是由高尔基囊的边缘膨大而出来的泡状结构，因此它本质上是分泌泡的一种，其中含有多种水解酶。这些酶是在租面内质网的核糖体上合成并转运到高尔基囊的。】

4．下列分子中不能通过无蛋白脂双层膜的是哪一项 (1分)

A．二氧化碳 B．乙醇 C．尿素 D．葡萄糖

[记忆性内容，注意水也不能直接通过，人家有水通道蛋白]

5．以下哪种组蛋白不属于核小体的核心蛋白 (1分)

A．Hl B．H2A C．H2B D．I-13 E．H4

[核小体是染色体的基本结构单位，由DNA和组蛋白(histone)构成，是染色质（染色体）的基本结构单位。由4种组蛋白H2A、H2B、H3和H4， 每一种组蛋白各二个分子，形成一个组蛋白八聚体，约200 bp的DNA分子盘绕在组蛋白八聚体构成的核心结构外面，形成了一个核小体。这时染色质的压缩包装 比(packing ratio)为6左右，即DNA由伸展状态压缩了近6倍。200 bpDNA为平均长度；不同组织、不同类型的细胞，以及同一细胞里染色体的不同区段中，盘绕在组蛋白八聚体核心外面的DNA长度是不同的。如真菌的可以短到只有154 bp，而海胆精子的可以长达260bp，但一般的变动范围在180bp到200bp之间。在这 200bp中，146 bp是直接盘绕在组蛋白八聚体核心外面，这些DNA不易被核酸酶消化，其余的DNA是用于连接下一个核小体。连接相邻2个核小体的DNA分子上结合了另一种组蛋白H1。组蛋白H1包含了一组密切相关的蛋白质，其数量相当于核心组蛋白的一半，所以很容易从染色质中抽提出来。所有的H1被除去后 也不会影响到核小体的结构，这表明H1是位于蛋白质核心之外的。]

6．下列哪些细胞器具有质子泵 (2分)

A．内质网 8．高尔基体C．溶酶体 D．线粒体 E．叶绿体

【质子泵的驱动依赖于ATP水解释放的能量，质子泵在泵出氢离子时造成膜两侧的pH梯度和电位梯度。溶酶体是要在酸性条件下起作用的，要是溶酶体酶泄漏到细胞质中的话会失效的，所以需要把H离子泵入溶酶体中。线粒体和叶绿体就不用说了吧】

7．线粒体在合成ATP过程中需要下列哪些条件 (2分)

A．基质中含有0： B．基质中含ADP

C．基质中的H+浓度大于膜间隙D．基质中的H+浓度小于膜间隙

8．在细胞减数分裂过程中会出现下列哪些现象 (2分)

A．同源染色体配对 B．DNA复制

C．同源染色体间交换 D．基因发生变异

9．电子显微镜下的细胞质膜体现出“暗一亮一暗”的结构，一般认为主要原因有哪些：(2 分)

A．磷脂分子的亲水头易被染色 B．外在膜蛋白的存在

C．胞外基质和膜下细胞骨架的存在 D．跨膜蛋白的存在

【三明治结构，暗的是蛋白质，明的是脂质。那个三明治结构,厚约7.5nm.这就是所谓的"单位膜"模型.它由厚约3.5nm的双层脂分子和内外表面各厚约2nm的蛋白质构成。

10．下面关于组蛋白的说法哪些是正确的：(3分)

A．组蛋白普遍存在于真核细胞；

B．组蛋白在物种间很保守，进化缓慢；

C．组蛋白富含组氨酸；

D．组蛋白呈现碱性；

E．组蛋白的修饰会影响基因的表达。

【原核细胞及线粒体叶绿体的DNA是裸露的，真核才和组蛋白结合，才叫染色质（体）。进化保守。组蛋白含精氨酸和赖氨酸，那俩都是碱性氨基酸，所以组蛋白呈碱性。记住阿，它叫组蛋白，但不含组氨酸。组蛋白乙酰化就是组蛋白的修饰，影响基因表达（DNA甲基化也行）。】

11．人体内嘌呤核苷酸分解代谢的主要终产物是以下哪一种? (1分)

A．尿素； 8．尿酸； C．丙氨酸；D．肌酸；E．肌酸酐

【嘌呤核苷酸的分解代谢，主要发生在肝、小肠及肾，代谢终产物是尿酸。黄嘌呤氧化酶是分解代谢中重要的酶。嘌呤代谢异常导致尿酸过多引起痛风症，临床上常用别嘌呤醇治疗痛风症。多说一句，嘧啶核苷酸的分解代谢：胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶，尿嘧啶最终生成NH3、CO2及β-丙氨酸。胸腺嘧啶降解成β-氨基异丁酸】

12．α—D一葡萄糖和β-D-葡萄糖的主要区别是下列哪一个? (1分A)
A．第l位碳原子上的羟基 B．第2位碳原子上的羟基
C．第5位碳原子上的羟基 D．第4位碳原子上的羟基
【这个题看图吧】

13．按照脂肪酸的分类，油酸应该属于哪一类脂肪酸? (1分)

A．软脂肪酸 B花生四烯酸 C．硬脂肪酸 D．不饱和脂肪酸

油酸学名：十八碳-顺-9-烯酸，18:1Δ9c。含18个碳原子和1个双键的不饱和脂肪酸。熔点为13.4℃，是构成动、植物油脂的一种重要成分。】

14．在氨基酸的分类中，下面哪一个氨基酸属于芳香族氨基酸?(1分)

A．丙氨酸 B．丝氨酸 C．色氨酸 D．亮氨酸

【酪氨酸（Tyrosine）、苯丙氨酸（Phenylalanine）、色氨酸（tryptophan），背下来吧。】

15．蛋白质的肽键是以下列哪一种方式形成的? (1分A)
A．α一氨基与α一羧基缩合而成 B．α一氨基与β一羧基缩合而成
C．β一氨基与α一羧基缩合而成 D．β一氨基与β一羧基缩合而成
【肽键就是氨基酸的α-羧基与相邻的另一氨基酸的α-氨基脱水缩合的共价键，故肽链两端有自由的α-氨基或α-羧基，分别称为氨基末端或羧基末端。】

16．下列哪一个是DNA和RNA二者的主要区别? (1分)

A、(酯键)，B、(核糖)．C、(碱基)，D、(磷酸基)。

17．同工酶具有以下哪个特性?(1分)

A．具有相同的蛋白质分子结构 B．理化性质相同

C．催化相同的化学反应 D．免疫性能相同

【定义1：具有相同底物，但电泳迁移率不同的酶。可来源于多个基因座或等位基因的表达，也可能是基因翻译后形成的。定义2：来源于同一种系、机体或细胞的同一种酶具有不同的形式。催化同一化学反应而化学组成不同的一组酶。产生同工酶的主要原因是在进化过程中基因发生变异，而其变异程度尚不足以成为一个新酶。全解释了吧~ 】

18．使用离心机离心l00毫升样品之前最重要的操作步骤是平衡，正确的操作是以下哪一个?(1分)

A．目测

B．用量筒量取同样体积的样品溶液分别倒入两个离心管中

C．用托盘天平平衡两个离心管，然后将样品溶液分别倒入离心管

D．将样品溶液分别倒入两个离心管中，然后用托盘天平进行平衡

19．以下关于酶的描述，哪些是不正确的?(2分)

A大多数酶的化学本质是蛋白质

B．所有的酶都必须结合辅基或辅酶才能发挥催化作用；

C．都具有立体异构专一性

D．能显著地改变化学反应速率

20．在生物大分子的分离纯化过程中，能将生物大分子与无机盐及有机小分子分离的方法

是以下哪些? (3分)

A．离子交换层析 B．凝胶过滤层析

C．滤纸过滤 D．透析 E．离心

【离子交换层析定义：固定相是离子交换剂的层析分离技术。样品中待分离的溶质离子，与固定相上所结合的离子交换，不同的溶质离子与离子交换剂上离子化的基团的亲和力和结合条件不同，洗脱液流过时，样品中的离子按结合力的弱强先后洗脱。在生物化学和分子生物学领域此法常用于分离蛋白质、核酸等生物大分子。
凝胶过滤层析：使用有一定大小孔隙的凝胶作层析介质(如葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)，利用凝胶颗粒对分子量和形状不同的物质进行分离的层析技术。由于各种分子的大小、形状不同，扩散到凝胶孔隙内的速度不同，因而通过层析柱的快慢不同而分离。
滤纸过滤：这个是可溶性溶质与不可溶物质的分离
透析：穿过膜的选择性扩散过程。可用于分离分子量大小不同的溶质，低于膜所截留阈值分子量的物质可扩散穿过膜，高于膜截留阈值分子量的物质则被保留在半透膜的另一侧。
离心：利用物质的密度等方面的差异，用旋转所产生背向旋转轴方向的离心运动力使颗粒或溶质发生沉降而将其分离、浓缩、提纯和鉴定的一种方法。物质的沉淀与离心力大小相关，而离心力取决于离心速度和旋转半径。一般按旋转速度分低速离心、高速离心和超速离心。】

21．植物的微生物病害可引起植物机能失灵，代谢紊乱而导致植物生存能力下降，甚至死亡或极大地减少产量。哪种菌是较少引起植物致病的微生物?(1分)

A．细菌B．放线菌 C．霉菌 D．植物病毒

【放线菌一般是产抗生素的】

22．巴斯德采用曲颈瓶试验来验证下列哪种学说?(1分)

A．驳斥自然发生说 B．证明微生物致病

C．认识到微生物的化学结构 D．提出自然发生说

23．普通光学显微镜用油镜观察时镜油应该加在哪个部位?(1分)

A．标本上 B．物镜上 C．标本和物镜之间 D．目镜上

【光线通过不同密度的介质物体（玻片→空气→透镜）时，部分光线会发生折射而散失，进入镜筒的光线少，视野较暗，物体观察不清。如在透镜与玻片之间滴加和玻璃折射率（n=1.52）相仿的香柏油（n=1.515），则使进入油镜的光线增多，视野亮度增强，物象清晰。】

24．接种环的烧灼灭菌应该在何时进行?(1分)

A使用前 B．使用后 C使用前及使用后 D．储存前

25．高压蒸汽灭菌锅的灭菌原理是以下哪一项?(1分)

A．高压 B．高温 C．高湿 D．高压加高湿

【高压蒸汽灭菌锅利用的是高温而不是高压。】

26．微生物固体培养时通常用的器皿是哪一种?(1分)

A．三角瓶 B．试管 C．试剂瓶 D．培养皿

27．微生物固体培养时培养基中琼脂的作用是哪一种?(1分)A

A．凝固剂 B．营养剂 C．生长调节剂 D．无机盐

【固体培养基：在液体培养基中加入1％～2％琼脂作凝固剂，
半固体培养基：在液体培养基中加入0.2％～0.5％的琼脂制成的培养基】

28．以下哪些菌种可用于生产酸奶?(2分)

A．枯草芽孢杆菌 B．嗜热链球菌C．保加利亚乳杆菌D．灰色链霉菌

【枯草芽孢杆菌：可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。有的菌株是α-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生产菌；有的菌株具有强烈降解核苷酸的酶系，故常作选育核苷生产菌的亲株或制取5'-核苷酸酶的菌种。在遗传学研究中应用广泛。
嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌活菌真正对人体起作用的是其乳发酵产物和底物。
由灰色链霉菌(Streptomycesgriseus)培养液提取而得的微生物蛋白酶，有极强的蛋白水解作用，可切断蛋白质所含肽键的80％。能水解纤维蛋白、黏蛋白。在体内能与其抑制物结合，使酶活性中心受到保护，输送至病变组织，又能同抑制物分离，恢复其酶活性。医学上用于抗炎消肿。】

29．微生物产生的具有温室效应的气体有哪些? (2分)

A．C02 B．H2. C．CH4 D．N20

【目前大气中主要的温室气体有六种：CO2、CH4、N2O、HFCs、PFCs、SF6。
CO2 二氧化碳：二氧化碳是主要的温室气体，其全球变暖影响比例因素为60%。现代大气中CO2增加的原因主要是由于人类长期使用化石燃料(如，煤、石油、天然气等)所造成的。微生物呼吸么么。
CH4 甲烷：甲烷是天然气的主要成分。甲烷主要由厌氧微生物活动产生。又因为在沼泽地颇为常见（气泡形式），所以甲烷俗名又称沼气。一个分子CH4产生的温室效应强度约是一个CO2分子的7.5倍。绝大部分甲烷来源于人类的活动。
N2O 氧化亚氮：氧化亚氮是一种微量温室气体。因具有较长的大气寿命，一般是150年，因此是一种高强度温室气体。N2O的主要源于陆地-土壤植被系统的释放，以及化石燃料和生物质燃烧。农业中氮肥的使用也增加了N2O的大气排放。】

第二部分41题(48分)

30．蕨类植物进行减数分裂后形成的第一个结构是(1分)

A． 孢子； B． 精子； C． 孢子体； D． 配子体

蕨类的孢子体也就是蕨类植物体，包括根、茎、叶、孢子囊群等结构，其孢子囊中的孢子母细胞经减数分裂即形成具有单套染色体的孢子，孢子成熟后，借风力或水力散布出去，遇到适宜的环境，即开始萌发生长，最后形成如小指甲大小的配子体，配子体上生有雄性生殖器官（精子器）和雌性生殖器官（颈卵器），精子器里的精子，借助水游入颈卵器与其中的卵细胞结合，形成具有双套染色体的受精卵，如此又进入孢子体世代，即受精卵发育成胚，由胚长成独立生活的孢子体。】

31．2009年，中国颁发了具有自主知识产权的两个转基『犬l水稻品种的生产应用安全证书。

这两个转基因水稻均是哪一类： (1分)

A．转抗虫基因水稻 8．转植酸酶基因水稻

C．转谷氨酸合成酶基因水稻 D．转生长素合成酶基因水稻

32．地钱是研究苔类植物的常用材料，目前已知其营养体的性别是由性染色体决定的，并且属于XY型，那么地钱雄性营养体的性染色体为(1分)

A．XX B．XY C． X D．Y E． YY

【地钱孢子体寄生在配子体上，孢蒴内孢子母细胞经过减数分裂发育成孢子(N).孢子借弹丝的力量散出,在适宜的环境中萌发成雌性或雄性的原丝体,进而发育成新的雌,雄配子体】

33．导管与管胞均是木质部中执行运输功能的细胞，它们的主要差别在于哪一项：(1分)

A是否是死细胞；B 次生壁加厚方式；

C穿孔板的有无；D细胞的长宽比

【导管分子是一个死细胞。成熟时没有生活的原生质，次生壁具有各种式样的木质化增厚，端壁溶解消失形成穿孔。许多个导管分子以细胞的顶端对顶端连接起来就形成了导管。
导管和管胞 导管分子和管胞都是厚壁伸长的死细胞，但管胞是单个细胞，末端尖锐，端壁没有穿孔，上下连接的管胞靠侧壁上的纹孔传递水分。】

34．提取植物叶绿素时经常采用的试剂是：(1分)

A．乙醇 B． 甘油 C． 重蒸水 D． 丙酮

【高中学过的，提取植物叶绿素用的是乙醇和丙酮。
甘油：食品加工业中通常使用的甜味剂和化妆品中的保湿剂。
重蒸水：将经过一次蒸馏后的水,再次蒸馏所得到的水。一般用在比如冰冻蚀刻等要求高的实验中】

35．植物组织培养中细胞分裂素与生长素比值低时诱导(1分)

A．芽的分化 B．根的分化 C．叶的分化 D．芽的休眠

【生长素用量比细胞分裂素用量,比值高时,有利于根的分化,抑制芽的形成:比值低时,有利于芽的分化,抑制根的形成.比值适中时,促进愈伤组织的生长.高中内容吧。】

36．促使植物叶表皮气孔关闭的植物激素是(1分)

A．ABA B．CTK C．ETH D．GA3 E．IAA
【脱落酸：在缺水条件下，植物叶子中ABA的含量增多，引起气孔关闭。这是由于ABA促使保卫细胞的K+外渗，细胞失水使气孔关闭。用ABA水溶液喷施植物叶子，可使气孔关闭，降低蒸腾速率。因此，ABA可作为抗蒸腾剂。】37．利用暗期间断可以抑制短曰照植物开花，选择下列哪种光最为有效(1分)

A．红光 B．远红光 C．蓝紫光 D．绿光 E．白光
【在可见光中，光照诱导成花或光间断破坏诱导的效应，以660纳米的红光为最有效。这种作用可以被730纳米的远红光解除,又可以被660纳米的红光恢复。这种相互逆转可以反复多次。】

38．水稻茎的维管束属于(1分)

A．双韧维管束 B．周韧维管束

C．外韧无限维管束 D．外韧有限维管束

39．下列哪些属于同源器官(2分)

A．玫瑰茎上的刺与仙人掌茎上的刺B．山楂树的枝刺与马铃薯(土豆)

C．马铃薯(土豆)与甘薯(地瓜)D．甘薯(地瓜)与菟丝子的吸器

【玫瑰茎上的刺是皮刺，仙人掌的刺是叶的变态。山楂树的枝刺与马铃薯(土豆)是茎的变态，甘薯(地瓜)是根的变态，菟丝子的吸器是由根变态而成的，种子萌发时幼芽无色，丝状，附着在土粒上，另一端形成丝状的菟丝，在空中旋转，碰到寄主就缠绕其上，在接触处形成吸根，进入寄主组织后，部分细胞组织分化为导管和筛管，与寄主的导管和筛管相连。】

40．被子植物的雌配子体是指(1分)

A．雌蕊 B． 胚珠 C．八核胚囊 D．子房

七个细胞八个核

41．下列说法中哪些是正确的(2分)

A．裸子植物具有颈卵器
B．双受精是种子植物特有的现象；
C．被子植物成熟花粉粒有一个营养细胞和一个精细胞；
D．被子植物花的花萼、花瓣、雄蕊和雌蕊都是同源器官
【双受精是被子植物特有的现象。被子植物成熟花粉粒有一个营养细胞和2个精细胞吧。被子植物花的花萼、花瓣、雄蕊和雌蕊都是同源器官，都是变态的叶】

42．被子植物的生活史中，配子体阶段的第一个细胞是(1分)

A．合子 B．配子 C，孢子 D．种子
【被子植物配子体世代：由大、小孢子母细胞减数分裂，形成单核大小孢子开始，到含卵的成熟胚囊和含2或3细胞的成熟花粉粒，萌发花粉管，双受精开始为止，是植物体的有性阶段，称有性世代。】

43．裸子植物的胚乳是(1分)

A．精卵受精后，由珠心细胞发育来的
B．精卵受精后，由雌配子体细胞发育来的
C．精卵受精后，由受精极核发育来的
D．精卵受精后，由颈卵器腹沟细胞发育来的
【精卵受精后，由雌配子体细胞发育来的，所以裸子植物的胚乳是N】

44．在对木雕文物进行修复过程中常需要对文物碎屑进行离析后显微镜观察，判断该文物是由什么植物材料制作的，如果观察到下列哪类细胞就可判断其不可能是柏木制作的：(1分)

A．筛胞； 8．导管分子； C．纤维；D．管胞

【多数裸子植物茎的次生木质部主要由管胞，木薄壁组织和射线所组成，无导管，无典型木纤维。松属植物一般缺少韧皮纤维，而红豆杉科，柏科，杉科一般都有纤维。】

45．园艺师想从新移栽的一株松树上收集种子，他发现这株松树在2009年4月出现了雌球果，请问到什么时间园艺师才可能从这些雌球果中收集到成熟种子?(1分)

A．2009年9月； 8． 2009年11月；

C．2010年1月；D． 2010年9月

松树传粉时的雌球花近直立状。传粉后，鳞片闭合，球果开始缓慢的发育。约在传粉后13个月以后的春季或初夏发生受精，继而球果开始迅速生长，一般在第 2年的夏末和秋季成熟后，着球果成熟。】

46．酵母菌产生的有性孢子是(1分)

A．芽孢子 B．卵孢子 C．分生孢子 D．子囊孢子

【酵母菌的出芽生殖出的芽可以叫芽生孢子，是一种无性孢子，因为单倍体和二倍体的酵母菌都能长期存在并无性繁殖，所以芽生孢子有单倍体也有二倍体；酵母菌进行有性生殖时，两个单倍体细胞经过质配，核配，形成二倍体细胞，再减数分裂，产生子囊孢子，是一种有性孢子，和无性生殖产生的孢子有本质区别，子囊孢子一定是单倍体的，可以直接萌发成一个单倍体酵母菌】

47．芦笋是一种很可口的蔬菜，通过芦笋刀口切面可以看到一些分散排列的细胞团，这些细胞团是什么?据此特征判断芦笋是单子叶植物还是双子叶植物。(1分)

A．石细胞双子叶植物 B．维管束单子叶植物

C．纤维束双子叶植物 D．石细胞单子叶植物

【单子叶维管束散状排列】

48．在观察双子叶植物茎的初生结构横切面时，如果用碘液染色，则能观察到以下哪种现象：(1分)

A．在维管束外有一圈染成深蓝色的细胞，相当于是内皮层；

B．在维管束外有一。圈染成深蓝色的细胞，相当于是中柱鞘；

C．在表皮下有一圈染成深蓝色的细胞，相当于是外皮层；

D．在表皮’F有一圈染成深蓝色的细胞，相当二j二是厚角组织细胞

【向日葵皮层 ：靠进表皮的几层是切线壁加厚的厚角细胞。内为薄壁细胞，其中分布有树脂道，皮层细胞含有叶绿体，细胞之间有细胞间隙，皮层的最内层细胞含淀粉粒，称为淀粉鞘内皮）用碘液染色后，更为清楚】49．从生殖角度来看，被子植物的花和蕨类植物的孢子叶球的相同之处是：(1分)

A．都能进行有性生殖产生孢子； B．都能进行有性生殖产生配子；
C．都能进行无性生殖产生配子； D．都能进行无性生殖产生孢子
【蕨类植物是不产生种子的低等维管植物。具有明显的世代交替现象。无性生殖时，在孢子体上产生孢子囊。在小型叶蕨类中，孢子叶通常集生在枝的顶端，形成球状或穗状，称为孢子叶穗或孢子叶球。真蕨类孢子囊通常生在孢子叶的背面、边缘或集生在一个特化的孢子叶上聚集成孢子囊群。囊群有盖或无盖。孢子囊内产生孢子，有同型与异型之分。】

Ⅳ 用sepharose4B柱层析分离蛋白质,这是（） A离子交换柱层析 B吸附柱层析 C凝胶过滤柱层析 D分配柱层析

选c
亲和柱/亲和膜,都是医用分离器.如除内毒素亲和柱,以
Sepharose 4B为基质，配基为组氨酸，壳聚糖，季铵盐等
你可以参考下面的链接

Ⅳ 如何分析对晶格形成很重要的氨基酸

氨基酸结构与分类
（一）基本氨基酸
组成蛋白质的20种氨基酸称为基本氨基酸。它们中除脯氨酸外都是α-氨基酸，即在α-碳原子上有一个氨基。基本氨基酸都符合通式，都有单字母和三字母缩写符号。
按照氨基酸的侧链结构，可分为三类：脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸和杂环氨基酸。
1.脂肪族氨基酸 共15种。
侧链只是烃链：Gly, Ala, Val, Leu, Ile后三种带有支链，人体不能合成，是必需氨基酸。
侧链含有羟基：Ser, Thr许多蛋白酶的活性中心含有丝氨酸，它还在蛋白质与糖类及磷酸的结合中起重要作用。
侧链含硫原子：Cys,
Met两个半胱氨酸可通过形成二硫键结合成一个胱氨酸。二硫键对维持蛋白质的高级结构有重要意义。半胱氨酸也经常出现在蛋白质的活性中心里。甲硫氨酸的硫原子有时参与形成配位键。甲硫氨酸可作为通用甲基供体，参与多种分子的甲基化反应。
侧链含有羧基：Asp（D）, Glu（E）
侧链含酰胺基：Asn（N）, Gln（Q）
侧链显碱性：Arg（R）, Lys（K）
2.芳香族氨基酸 包括苯丙氨酸（Phe,F）和酪氨酸(Tyr,Y)两种。 酪氨酸是合成甲状腺素的原料。
3.杂环氨基酸
包括色氨酸(Trp,W)、组氨酸(His)和脯氨酸(Pro)三种。其中的色氨酸与芳香族氨基酸都含苯环，都有紫外吸收(280nm)。所以可通过测量蛋白质的紫外吸收来测定蛋白质的含量。组氨酸也是碱性氨基酸，但碱性较弱，在生理条件下是否带电与周围内环境有关。它在活性中心常起传递电荷的作用。组氨酸能与铁等金属离子配位。脯氨酸是唯一的仲氨基酸，是α-螺旋的破坏者。
B是指Asx，即Asp或Asn；Z是指Glx，即Glu或Gln。
基本氨基酸也可按侧链极性分类：
非极性氨基酸：Ala, Val, Leu, Ile, Met, Phe, Trp, Pro共八种
极性不带电荷：Gly, Ser, Thr, Cys, Asn, Gln, Tyr共七种
带正电荷：Arg, Lys, His
带负电荷：Asp, Glu
（二）不常见的蛋白质氨基酸
某些蛋白质中含有一些不常见的氨基酸，它们是基本氨基酸在蛋白质合成以后经羟化、羧化、甲基化等修饰衍生而来的。也叫稀有氨基酸或特殊氨基酸。如4-羟脯氨酸、5-羟赖氨酸、锁链素等。其中羟脯氨酸和羟赖氨酸在胶原和弹性蛋白中含量较多。在甲状腺素中还有3,5-二碘酪氨酸。
（三）非蛋白质氨基酸
自然界中还有150多种不参与构成蛋白质的氨基酸。它们大多是基本氨基酸的衍生物，也有一些是D-氨基酸或β、γ、δ-氨基酸。这些氨基酸中有些是重要的代谢物前体或中间产物，如瓜氨酸和鸟氨酸是合成精氨酸的中间产物，β-丙氨酸是遍多酸（泛酸，辅酶A前体）的前体，γ-氨基丁酸是传递神经冲动的化学介质。
二、氨基酸的性质
（一）物理性质
α-氨基酸都是白色晶体，每种氨基酸都有特殊的结晶形状，可以用来鉴别各种氨基酸。除胱氨酸和酪氨酸外，都能溶于水中。脯氨酸和羟脯氨酸还能溶于乙醇或乙醚中。
除甘氨酸外，α-氨基酸都有旋光性，α-碳原子具有手性。苏氨酸和异亮氨酸有两个手性碳原子。从蛋白质水解得到的氨基酸都是L-型。但在生物体内特别是细菌中，D-氨基酸也存在，如细菌的细胞壁和某些抗菌素中都含有D-氨基酸。
三个带苯环的氨基酸有紫外吸收，F:257nm,ε=200; Y:275nm,ε=1400;
W:280nm,ε=5600。通常蛋白质的紫外吸收主要是后两个氨基酸决定的，一般在280nm。
氨基酸分子中既含有氨基又含有羧基，在水溶液中以偶极离子的形式存在。所以氨基酸晶体是离子晶体，熔点在200℃以上。氨基酸是两性电解质，各个解离基的表观解离常数按其酸性强度递降的顺序，分别以K1'、K2'来表示。当氨基酸分子所带的净电荷为零时的pH称为氨基酸的等电点(pI)。等电点的值是它在等电点前后的两个pK'值的算术平均值。
氨基酸完全质子化时可看作多元弱酸，各解离基团的表观解离常数按酸性减弱的顺序，以pK1' 、pK2'
、pK3'表示。氨基酸可作为缓冲溶液，在pK'处的缓冲能力最强，pI处的缓冲能力最弱。
氨基酸的滴定曲线如图。
（二）化学性质
1.氨基的反应
（1）酰化
氨基可与酰化试剂，如酰氯或酸酐在碱性溶液中反应，生成酰胺。该反应在多肽合成中可用于保护氨基。
（2）与亚硝酸作用
氨基酸在室温下与亚硝酸反应，脱氨，生成羟基羧酸和氮气。因为伯胺都有这个反应，所以赖氨酸的侧链氨基也能反应，但速度较慢。常用于蛋白质的化学修饰、水解程度测定及氨基酸的定量。
（3）与醛反应
氨基酸的α-氨基能与醛类物质反应，生成西佛碱-C=N-。西佛碱是氨基酸作为底物的某些酶促反应的中间物。赖氨酸的侧链氨基也能反应。氨基还可以与甲醛反应，生成羟甲基化合物。由于氨基酸在溶液中以偶极离子形式存在，所以不能用酸碱滴定测定含量。与甲醛反应后，氨基酸不再是偶极离子，其滴定终点可用一般的酸碱指示剂指示，因而可以滴定，这叫甲醛滴定法，可用于测定氨基酸。
（4）与异硫氰酸苯酯(PITC)反应
α-氨基与PITC在弱碱性条件下形成相应的苯氨基硫甲酰衍生物（PTC-AA），后者在硝基甲烷中与酸作用发生环化，生成相应的苯乙内酰硫脲衍生物（PTH-AA）。这些衍生物是无色的，可用层析法加以分离鉴定。这个反应首先为Edman用来鉴定蛋白质的N-末端氨基酸，在蛋白质的氨基酸顺序分析方面占有重要地位。
（5）磺酰化
氨基酸与5-(二甲胺基)萘-1-磺酰氯(DNS-Cl)反应，生成DNS-氨基酸。产物在酸性条件下(6NHCl)100℃也不破坏，因此可用于氨基酸末端分析。DNS-氨基酸有强荧光，激发波长在360nm左右，比较灵敏，可用于微量分析。
（6）与DNFB反应
氨基酸与2,4-二硝基氟苯(DNFB)在弱碱性溶液中作用生成二硝基苯基氨基酸（DNP氨基酸）。这一反应是定量转变的，产物黄色，可经受酸性100℃高温。该反应曾被英国的Sanger用来测定胰岛素的氨基酸顺序，也叫桑格尔试剂，现在应用于蛋白质N-末端测定。
（7）转氨反应
在转氨酶的催化下，氨基酸可脱去氨基，变成相应的酮酸。
2.羧基的反应
羧基可与碱作用生成盐，其中重金属盐不溶于水。羧基可与醇生成酯，此反应常用于多肽合成中的羧基保护。某些酯有活化作用，可增加羧基活性，如对硝基苯酯。将氨基保护以后，可与二氯亚砜或五氯化磷作用生成酰氯，在多肽合成中用于活化羧基。在脱羧酶的催化下，可脱去羧基，形成伯胺。
3茚三酮反应
氨基酸与茚三酮在微酸性溶液中加热，最后生成蓝色物质。而脯氨酸生成黄色化合物。根据这个反应可通过二氧化碳测定氨基酸含量。
4.侧链的反应
丝氨酸、苏氨酸含羟基，能形成酯或苷。
半胱氨酸侧链巯基反应性高：
（1）二硫键(disulfide bond)
半胱氨酸在碱性溶液中容易被氧化形成二硫键，生成胱氨酸。胱氨酸中的二硫键在形成蛋白质的构象上起很大的作用。氧化剂和还原剂都可以打开二硫键。在研究蛋白质结构时，氧化剂过甲酸可以定量地拆开二硫键，生成相应的磺酸。还原剂如巯基乙醇、巯基乙酸也能拆开二硫键，生成相应的巯基化合物。由于半胱氨酸中的巯基很不稳定，极易氧化，因此利用还原剂拆开二硫键时，往往进一步用碘乙酰胺、氯化苄、N-乙基丁烯二亚酰胺和对氯汞苯甲酸等试剂与巯基作用，把它保护起来，防止它重新氧化。
（2）烷化
半胱氨酸可与烷基试剂，如碘乙酸、碘乙酰胺等发生烷化反应。
半胱氨酸与丫丙啶反应，生成带正电的侧链，称为S-氨乙基半胱氨酸（AECys）。
（3）与重金属反应
极微量的某些重金属离子，如Ag+、Hg2+，就能与巯基反应，生成硫醇盐，导致含巯基
追问：
的酶失活。
5. 以下反应常用于氨基酸的检验：
l酪氨酸、组氨酸能与重氮化合物反应(Pauly反应)，可用于定性、定量测定。组氨酸生成棕红色的化合物，酪氨酸为桔黄色。
l精氨酸在氢氧化钠中与1-萘酚和次溴酸钠反应，生成深红色，称为坂口反应。用于胍基的鉴定。
l酪氨酸与硝酸、亚硝酸、硝酸汞和亚硝酸汞反应，生成白色沉淀，加热后变红，称为米伦反应，是鉴定酚基的特性反应。
l色氨酸中加入乙醛酸后再缓慢加入浓硫酸，在界面会出现紫色环，用于鉴定吲哚基。
在蛋白质中，有些侧链基团被包裹在蛋白质内部，因而反应很慢甚至不反应。
三、色谱与氨基酸的分析分离
1.色谱（chromatography）的发展史
最早的层析实验是俄国植物学家Цвет在1903年用碳酸钙分离叶绿素，属于吸附层析。40年代出现了分配层析，50年代出现了气相色谱，60年代出现HPLC，80年代出现了超临界层析，90年代出现的超微量HPLC可分离ng级的样品。
2.色谱的分类：
按流动相可分为气相、液相、超临界色谱等；
按介质可分为纸层析、薄层层析、柱层析等；
按分离机制可分为吸附层析、分配层析、分子筛层析等
3.色谱的应用
可用于分离、制备、纯度鉴定等。
定性可通过保留值、内标、标准曲线等方法，定量一般用标准曲线法。
氨基酸的分析分离是测定蛋白质结构的基础。在分配层析和离子交换层析法开始应用于氨基酸成分分析之后，蛋白质结构的研究才取得了显著的成就。现在这些方法已自动化。
氨基酸从强酸型离子交换柱的洗脱顺序如下：
Asp,Thr,Ser,Glu,Pro,Gly,Ala,Cys,Val,Met,Ile,Leu,Tyr,Phe,Lys,His,(NH3),Arg

Ⅵ 软膏与凝胶得区别

软膏ǎngāo
(1)
[ointment]∶用于皮肤的含脂类或油脂类物质(如凡士林、猪油、羊毛脂)为基质的半固体药物制剂
(2)
[unguent]∶润滑剂或药膏(如用于痛处或烧伤)gel ning jiao
又称冻胶。溶胶或溶液中的胶体粒子或高分子在一定条件下互相连接，形成空间网状结构，结构空隙中充满了作为分散介质的液体（在干凝胶中也可以是气体），这样一种特殊的分散体系称作凝胶。没有流动性。内部常含有大量液体。例如血凝胶、琼脂的含水量都可达99%以上。可分为弹性凝胶和脆性凝胶。弹性凝胶失去分散介质后，体积显著缩小，而当重新吸收分散介质时，体积又重新膨胀，例如明胶等。脆性凝胶失去或重新吸收分散介质时，形状和体积都不改变，例如硅胶等。由溶液或溶胶形成凝胶的过程称为胶凝作用（gelation）。 [编辑本段]生物学和凝胶 生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性，然后通过实验选择出最有效的纯化流程。
1.测定——分子量、PI
当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时，可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围广阔的Superose HR预装柱很适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交换介质在多个含不同PH缓冲液的试管中，可简易地测出PI，并选择纯化用缓冲液的最佳PH.
2.选择——层析方法
若对目标蛋白的特性或样品成分不太了解，可尝试几种不同的纯化方法：
一] 使用最通用的凝胶过滤方法，选择分离范围广阔的介质如Superose、Sephacryl HR依据分子量将 样品分成不同组份。
二] 用含专一配体或抗体的亲和层析介质结合目标蛋白。亦可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质，再用以结合目标蛋白。一步即可得到高纯度样品。
三] 体积大的样品，往往使用离子交换层析加以浓缩及粗纯化。高盐洗脱的样品，可再用疏水层析纯化。疏水层析利用高盐吸附、低盐洗脱的原理，洗脱样品又可直接上离子交换等吸附性层析。两种方法常被交替使用于纯化流程中。
3.纯化——大量粗品
处理大量原液时，为避免堵塞柱子，一般使用sepharose big beads、sepharoseXL、sepharose fast flow等大颗粒离子交换介质。扩张柱床吸附技术利用多种STREAMLINE介质，直接从含破碎细胞或组织萃取物的发酵液中俘获蛋白。将离心、超滤、初纯化结合为一。提高回收率，缩短纯化周期。
4.纯化——硫酸氨样品 硫酸氨沉淀方法常被用来初步净化样品，经处理过的样本处于高盐状态下，很适合直接上疏水层析。若作离子交换，需先用Sephadex G-25脱盐。疏水层析是较新技术，随着介质种类不断增多，渐被融入各生产工艺中。利用Hitrap HIC Test Kit 和RESOURCE HIC Test Kit可在八种疏水介质中选择最适合介质及最佳的纯化条件。低盐洗脱的样品可稍加稀释或直接上其它吸附性层析。
5.纯水——糖类分子
固化外源凝订素如刀豆球蛋白、花生、大麦等凝集素，可结合碳水化合物的糖类残基，很适合用作分离糖化细胞膜组份、细胞、甚至亚细胞细胞器，纯化糖蛋白等。两种附上外源凝集素的Sepharose 6MB亲和层析介质，专为俘获整个细胞或大复合物，如膜囊等。
6.纯化——膜蛋白
膜蛋白分离常使用去污剂以保持其活性。离子性去污剂应选用与目标蛋白相反电荷者，避免在作离子交换时和目标蛋白竞争交换介质，籍此除去去污剂。非离子性去污剂可以疏水层析除去。
7.纯化——单抗、抗原 *单抗多为IgG.来源主要是腹水和融合瘤培养上清液。腹水有大量白蛋白、转铁蛋白和宿主抗体等。Mabselect、Protein G和Protein A对IgG的Fc区有专一性亲和作用，能一步纯化各种不同源的IgG.血清互补剂如小牛血清可先用蛋白G预处理，在培养前除去IgG.重组蛋白A介质Mabselect和rProtein A Sepharose FF对IgG有更高的载量和专一性，基团脱落更少。脱落的rProtein A用离子交换Q Sepharose HP或凝胶过滤Superdex 200，很容易去除。
*疏水层析Phenyl Sepharose HP亦很适合纯化IgG.宿主抗体和污染IgG可用凝胶过滤Superdex 200在精细纯化中去除。
*纯化IgG抗原最有效的方法是用活化偶联介质如CNBr、NHs activated Sepharose FF偶联IgG，再进一步获取IgG抗原。
*HiTrap IgM是用来纯化融合瘤细胞培养的单抗IgM，结合量达5mg IgM.HiTrap IgY是专门用来纯化IgY，结合量达100mg纯IgY.
8.纯化——重组蛋白 重组蛋白在设计、构建时应已融入纯化构想。样品多夹杂了破碎细胞或溶解产物，扩张柱床吸附技术STREAMLINE便很适合做粗分离。Amersham biosciences提供三个快速表达、一步纯化的融合系统。
一] GST融合载体使要表达的蛋白和谷胱甘肽S转移酶一起表达，然后利用Glutathione Sepharose 4B作亲和层析纯化，再利用凝血酶或因子Xa切开。
2. 蛋白A融合载体使要表达的蛋白和蛋白A的IgG结合部位融合在一起表达，以IgG Sepharose 6 FF纯化。
二] 含组氨酸标记（Histidine-tagged）的融合蛋白可用Chelating Sepharose FF螯合Ni2+金属，在一般或变性条件（8M尿素）下透过组氨酸螯合融合蛋白。HisTrap试剂盒提供整套His-Tag蛋白的纯化方法。
9.纯化——包涵体蛋白
包涵体蛋白往往需溶于6M盐酸胍或8M尿素中。高化学稳定性的Superose 12及Sepharose 6FF凝胶过滤介质很适合在变性条件下做纯化。变性纯化后的蛋白需要复性至蛋白的天然构象。Superdex 75、Q Sepharose FF和Phenyl Sepharose FF分别被发现有助包涵体蛋白的复性。一般包涵体蛋白样品的纯度越高，复性效果越好。SOURCE 30 RPC反相层析介质很适合纯化复性前的粗品，并可以1MnaOH重生。此方法纯化后的包涵体蛋白，复性回收率明显提高。
10.包涵体蛋白固相复性 *近年许多文献报导将包涵体蛋白在变性条件下固定（吸附）在层析介质上，一般用各种Sepharose FF离子交换层析介质。去除变性剂后，蛋白在介质上成功复性，再将复性好的蛋白洗脱下来。固相复性避免了一般复性过程中蛋白质聚体的形成，所以复性得率更高，而且无需大量稀释样品，并将复性和初纯化合二为一，大大节省时间及提高回收率。
*固相复性方法也被用于以HiTrap Chelating金属螯合层析直接复性及纯化包涵体形式表达的组氨酸融合蛋白；以HiTrap Heparin肝素亲和层析直接复性及纯化包涵体形式表达的含多个赖氨酸的融合蛋白。两种亲和层析预装柱均可反复多次重复使用，比一般试剂盒更方便、耐用。
11.纯化——中草药有效成分
中药的化学成分极其复杂。传统中药多是煎熬后服用，有效成份多较为亲水，包括生物碱、黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸、多糖、肽和蛋白质。灵活及综合性地利用多种层析方法。如离子交换、分子筛、反相层析，更容易分离到单一活性成分。Sephadex LH-20葡聚糖凝胶同时具备吸附性层析和分子筛功能，例：如用甲醇分离黄酮甙，三糖甙先被洗下来，二糖甙其次，单糖甙随后，最后是甙元。Sephadex LH-20可使用水、醇、丙酮、氯仿等各种试剂，广泛用于各种天然产物的分离，包括生物碱、甙、黄酮、醌类、内脂、萜类、甾类等。
*生物碱在酸性缓冲液中带正电，成为盐，HiTrap SP阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常近似的生物碱。相反，黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸等可溶于偏碱的缓冲液中，在HiTrap Q阴离子交换柱上分离效果良好。
*一般多糖纯化大多使用分子筛如Sephadex，Sephacryl.若分子量在600KD以下，并需更高分辨率，可选择新一代的Superdex.一般植物可能含水溶性、酸溶性、碱溶性多种多糖。综合利用分子筛及离子交换层析有助进一步获各组份纯品。另外，多糖药物需去除可引起过敏的蛋白质，传统Sevag方法用丁醇脱蛋白需反复数十次。阴阳离子交换法可以一、两步快速去除多糖中残存的蛋白质。SOURCE5、15、30RPC反相层析也很适合各种中药有效成分的检测、分离和放大制备。由于中药的成分非常复杂，SOURCE反相层析可用范围为PH1-14 ，并可用1M NaOH，1M HCL清洗、再生。比传统硅胶反相层析更易于工艺优化及在位清洗，寿命也更长。
12.纯化——肽类
肽类的来源有天然萃取，合成肽和重组肽三种。肽容易被酶降解，但可从有机溶剂或促溶剂中复性，所以多以高选择性的反相层析如SOURCE 30RPC、SOURCE 15RPC、SOURCE 5RPC或离子交换Minibeads、Monobeads作纯化。Superdex Peptide HR是专为肽分子纯化设计的凝胶过滤预装柱，能配合反相层析做出更精美的肽图。肽分子制备可用离子交换配合凝胶过滤Superdex 30 PG。医学都市多功能
13.纯化——核酸、病毒
核酸的纯化用于去除影响测序或PCR污染物等研究。核酸可大致上分为质粒DNA、噬菌体DNA和PCR产物等。病毒也可视作核酸大分子，和质粒DNA一样，可用分离大分子的Sephacry S-1000 SF、Superose或Sepharoce 4FF凝胶过滤介质去除杂蛋白，再配合离子交换如Mono Q、 SOURCE Q分离核酸。
14.纯化——寡核苷酸寡酸苷酸多应用在反义（anti-sense）DNA、RNA测序、PCR和cDNA合成等研究。合成后含三苯甲基的寡核苷酸以阴离子交换的Mono Q或快速低反压的SOURCE Q在PH12下可除副产物，并避免凝集和保护基的脱落。载量大大高过反相层析，可用做大量制备。不含三苯甲基的失败序列可用反相柱ProRPC去除。
15.脱盐、小分子去除
使用凝胶过滤介质Sephadex G10，G15，G25，G50等去除小分子，效率高，处理量可达床体积30%.只需在进样后收集首1/3-1/2柱体积的洗脱液，就可以去除该填料分离范围上限以下的小分子，简单直接。由于只是去除小分子，柱高10cm以上即可。整个过程一般可于数分钟至半小时完成。Sephadex G25系列介质专为蛋白质脱盐而设计，预装柱HiTrap Desalting（5ml）可用针筒操作。HiPrep Desalting（26ml）可在数分钟为多至10ml样品脱盐。
16.疫苗纯化 使用凝胶过滤介质Sepharose 4FF纯化疫苗，去除培养基中的杂蛋白，处理量可大于床体积10%.柱高一般40-70cm，整个过程约半至一小时。目前使用此法生产的疫苗品种有乙肝、狂犬、出血热、流感、肺结核、小儿麻痹疫苗等。分子量较小的疫苗可使用Sephacryl S-500HR，如甲肝疫苗等。
17.抗生素聚合物分析
中国药典从2000年版起要求抗生素头孢曲松钠需要找出聚合物占产品的白分比，规定使用Sephadex G10凝胶过滤法测定。
18.纯化-基因治疗用病毒载体
SORRCE 15Q
19.纯化-基因治疗用质粒
Q Sepharose XL，SOURCE 15Q，STREAMLINE Q，Sephacryl S500，Plasmidselect 在下游纯化中，可应用不同层析技术在纯化生物分子的同时，去除各种污染物。
1.去除——内毒素
内毒素又称热原。含脂肪A、糖类和蛋白，是带负电的复合大分子。
内毒素的脂肪A部份有很强的疏水性。但在高盐下会凝集，无法上疏水层析。利用疏水层析试验盒（17-1349-01）可选择结合目标蛋白的介质而去除内毒素。
内毒素与阴离子交换介质Q或DEAE Sepharose Fast Flow有较强结合。可在洗脱目标蛋白后用高盐缓冲液或NaOH去除。
利用CNBr或NHS Sepharose FF可偶联内毒素底物如LAL，PMB，自动成亲合层析介质结合内毒素。内毒素经常是多聚体，凝胶过滤层析可有效地将之去除。
2.去除——蛋白中的核酸
大量核酸增加样本黏度，令区带扩张，反压增加，降低分辨率和流速。药审和食检对核酸含量也有严格限制。
胞内表达蛋白的核酸问题尤其严重。核酸带阴电荷，在初步纯化时利用阳离子交换介质如STREAMLINESP，SP Sepharose Big Beads，SP或CM Sepharose FF，SP SepharoseXL结合目标蛋白，可除去大量核酸。
核酸在高盐下会和蛋白解离，疏水层析介质很适合用来结合目标蛋白，在纯化蛋白的同时去除核酸。
利用核酸酶将核酸切成小片断，用凝胶过滤做精细纯化时便很容易去除了。
3.去除——病毒和微生物
病毒和微生物可成为病原，应尽量减除。结合不同层析技术，使用注射用水，用NaOH定期进行仪器和凝胶的在位消毒和在位清洗，皆可避免污染物增加。
病毒大都有脂外壳。可用与目标蛋白电荷相反的S/D（solvent/detergent）处理，使病毒失活，如Triton和Tween.再用适当的离子交换介质如CM Sepharose FF结合目标蛋白，去除S/D.
其它污染物可以改变pH和离子强度使其从目标分子中解离或失活，凝胶过滤介质Superdex及多种吸附性介质，SOURCE都是很好的精细纯化介质，可去除多种微量污染物。
凝胶是指颗粒大小在1埃到10埃之间的混合物。高分子溶液和某些溶胶，在适当的条件下，整个体系会转变成一种弹性的半固体状态的稠厚物质，失去流动性。这种现象称为胶凝作用,所形成的产物叫做凝胶或冻胶.
“气凝胶”是指分散系为气态的，如：云，雾等，“固凝胶”有烟水晶等，“液凝胶”就是呈液态的胶体，如氢氧化铁胶体 。 [编辑本段]举例：
食品级葡甘露胶（Gum Konjac-GM）
葡甘露胶（又称：魔芋胶）系一种新型多用途微粒状可食用胶。这里推出之葡甘露胶是以优质魔芋中提取的葡萄甘露聚糖为原料，经脱杂处理后采用先进技术加工而成，其中添加成分不含任何非食用化学配料或色素。与传统的琼脂、果胶、海藻胶等食品添加剂相比，葡甘露胶在膨胀率、粘度、增稠、稳定性及使用方便程度上皆显著优于上述胶类，此外尚具有特殊的优点：无需添加任何凝固剂，在无糖、低糖或高糖条件下，在酸性、中性或碱性条件下，常温即可凝冻，凝胶性能理想；保持或强化了葡萄甘露聚糖所具有的降糖、降脂、减肥等保健功能，大大拓宽了魔芋应用的范围；价格低廉、使用方便。
葡甘露胶能广泛用于食品、饮料、医药、日用化工、科研等领域，作为琼脂、果胶、海藻胶等的替代产品，价格低廉，且使用时无需改变原有的设备及工艺，能大幅度降低添加剂的使用成本，是一种理想的新型凝胶添加剂。为满足不同产品开发的需要， 一、凝胶（果冻）型：能与各种天然果汁、物料及色素良好混合，作为广谱凝胶赋型剂，是制作果冻、水晶软糖等的极佳原料，也可作为培养基支持体，且不需再添加其它任何胶类或碱性成份；凝胶成型条件随意、脱杯完整，凝胶强度高、韧性大。 用量：0.7～0.9%。用法：在适量温水中溶胀3～5分钟，煮沸冷至70度左右时加入糖及各种配料，冷却至室温即成。
二、培养基型：用作替代琼脂作为花卉及其它植物进行组织培养的支持体。组培苗根粗、苗壮，使用效果理想，成本大幅降低。用量：0.5～0.6％。用法：在温水中溶胀3～5分钟，煮沸后冷却即可。 三、果肉（茶）饮料型：作为稳定剂与悬浮剂，替代琼脂和羧甲基纤维素等，广泛用于粒粒橙、果茶、果汁、豆奶、银耳羹、八宝粥等异相悬浮剂等（或混合）饮料中，防止沉淀或分层。 用量：0.15～0.25％左右。用法：在适量温水中充分溶胀后加入物料中。 四、冷冻制品型：用于冰棒、冰淇淋等各种冷冻制品，可增大膨胀，减少冰晶，提高抗热融性，使产品更加爽口。 用量：0.15～0.25％左右。用法：在适量温水中充分溶胀后加入物料中。 五、增稠型：用于果酱、米、面制品中，可增大膨胀率，提高韧性，改善赋型和口感。是进口洋槐豆胶的理想替代物。 用量：0.2～0.3％左右。用法：在适量温水中充分溶胀后加入物料中。

Ⅶ 求天津2010生物竞赛试题，谢

．在细胞质膜的组成中，胆固醇分子 (1分)

A．仅存在于高等动物细胞中 B．仅存在于高等植物细胞中

C．高等动植物细胞中都存在 D．还未确定

2．细胞质膜上具备的钠钾泵每消耗一一个ATP分子将会 (1分)

A．向细胞内转入2个K+向细胞外转出2个Na+

B．向细胞内转入2个Na+向细胞外转出2个K+

C．向细胞内转入3个K+向细胞外转出2个Na+

D．向细胞内转入2个K+向细胞外转出3个Na+

3．构成溶酶体的各种酶完成合成最终是在那一个部位 (1分)

A．在游离核糖体上

B．在粗面内质网的核糖体上

C．同时在游离和粗面内质网核糖体上

D．在这两种核糖体上轮流进行

4．下列分子中不能通过无蛋白脂双层膜的是哪一项 (1分)

A．二氧化碳 B．乙醇 C．尿素 D．葡萄糖

5．以下哪种组蛋白不属于核小体的核心蛋白 (1分)

A．Hl B．H2A C．H2B D．I-13 E．H4

6．下列哪些细胞器具有质子泵 (2分)

A．内质网 B．高尔基体C．溶酶体 D．线粒体 E．叶绿体

7． 线粒体在合成ATP过程中需要下列哪些条件 (2分)

A．基质中含有0： B．基质中含ADP

C．基质中的H+浓度大于膜间隙D．基质中的H+浓度小于膜间隙

8．在细胞减数分裂过程中会出现下列哪些现象 (2分)

A．同源染色体配对 B．DNA复制

C．同源染色体间交换 D．基因发生变异

9．电子显微镜下的细胞质膜体现出“暗一亮一暗”的结构，一般认为主要原因有哪些：(2 分)

A．磷脂分子的亲水头易被染色 B．外在膜蛋白的存在

C．胞外基质和膜下细胞骨架的存在 D．跨膜蛋白的存在

10．下面关于组蛋白的说法哪些是正确的：(3分)

A．组蛋白普遍存在于真核细胞；

B．组蛋白在物种间很保守，进化缓慢；

C．组蛋白富含组氨酸；

D．组蛋白呈现碱性；

E．组蛋白的修饰会影响基因的表达。

11．人体内嘌呤核苷酸分解代谢的主要终产物是以下哪一种? (1分)

A．尿素； B．尿酸； C．丙氨酸；D．肌酸；E．肌酸酐

12．Q—D一葡萄糖和B-D-葡萄糖的主要区别是下列哪一个? (1分)

A．第l位碳原子上的羟基 B．第2位碳原子上的羟基

C．第5位碳原子上的羟基 D．第4位碳原子上的羟基

13．按照脂肪酸的分类，油酸应该属于哪一类脂肪酸? (1分)

A．软脂肪酸 B花生四烯酸 C．硬脂肪酸 D．不饱和脂肪酸

14．在氨基酸的分类中，下面哪一个氨基酸属于芳香族氨基酸?(1分)

A．丙氨酸 B．丝氨酸 C．色氨酸 D．亮氨酸

15．蛋白质的肽键是以下列哪一种方式形成的? (1分)

A．a一氨基与a一羧基缩合而成 B．a一氨基与B～羧基缩合而成

C．岱一氨基与a一羧基缩合而成D．D一氨基与B一羧基缩合而成

16．下列哪一个是DNA和RNA二者的主要区别? (1分)

A、(酯键)，B、(核糖)．C、(碱基)，D、(磷酸基)。

17．同工酶具有以下哪个特性?(1分)

A．具有相同的蛋白质分子结构 B．理化性质相同

C．催化相同的化学反应 D．免疫性能相同

18．使用离心机离心l00毫升样品之前最重要的操作步骤是平衡，正确的操作是以下哪一个?(1分)

A．目测

B．用量筒量取同样体积的样品溶液分别倒入两个离心管中

C．用托盘天平平衡两个离心管，然后将样品溶液分别倒入离心管

D．将样品溶液分别倒入两个离心管中，然后用托盘天平进行平衡

19以下关于酶的描述，哪些是不正确的?(2分)

A大多数酶的化学本质是蛋白质

B．所有的酶都必须结合辅基或辅酶才能发挥催化作用；

C．都具有立体异构专一性

D．能显著地改变化学反应速率

20．在生物大分子的分离纯化过程中，能将生物大分子与无机盐及有机小分子分离的方法

是以下哪些? (3分)

A．离子交换层析 B．凝胶过滤层析

C．滤纸过滤 D．透析 E．离心

21．植物的微生物病害可引起植物机能失灵，代谢紊乱而导致植物生存能力下降，甚至死亡或极大地减少产量。哪种菌是较少引起植物致病的微生物?(1分)

A．细菌B．放线菌 C．霉菌 D．植物病毒

22．巴斯德采用曲颈瓶试验来验证下列哪种学说?(1分)

A．驳斥自然发生说 B．证明微生物致病

C．认识到微生物的化学结构 D．提出自然发生说

23．普通光学显微镜用油镜观察时镜油应该加在哪个部位?(1分)

A．标本上 B．物镜上 C．标本和物镜之间 D．目镜上

24．接种环的烧灼灭菌应该在何时进行?(1分)

A使用前 B．使用后 C使用前及使用后 D．储存前

25．高压蒸汽灭菌锅的灭菌原理是以下哪一项?(1分)

A．高压 B．高温 C．高湿 D．高压加高湿

26．微生物固体培养时通常用的器皿是哪一种?(1分)

A．三角瓶 B．试管 C．试剂瓶 D．培养皿

27．微生物固体培养时培养基中琼脂的作用是哪一种?(1分)A

A．凝固剂 B．营养剂 C．生长调节剂 D．无机盐

28．以下哪些菌种可用于生产酸奶?(2分)

A．枯草芽孢杆菌 B．嗜热链球菌C．保加利亚乳杆菌 D．灰色链霉菌

29．微生物产生的具有温室效应的气体有哪些? (2分)

A．C02 B．N2 C．CH4 D．N20 ．

Ⅷ 离子交换层析和亲和层析都可以用来分离所有的蛋白质吗哪种的效果更好

这个你问的太笼统了，方法没有最好的，只有最合适的

蛋白的分离纯化无非是内利用目标蛋白和容别的蛋白不同进行分离，这包括分子量大小，电荷，极性等特性的不同，此外包括别的特性，特别是酶例如酶需要辅酶象苹果酸 脱氢酶，或者底物，酶抑制剂，金属离子等，那相对应的纯化方法有凝胶过滤，离子交换，疏水层析，后面的可以分别把底物，酶抑制剂，金属离子偶联或鳌合到介质上做亲和介质，而象果酸脱氢酶也可以用染料亲和的办法，因为染料的结构和NAD类似。糖蛋白可以用凝集素亲和或者苯硼酸琼脂糖亲和分离等方法，总之要尽 量多知道目标蛋白的特性和了解各种分离的手段，就很容易找到最有效的分离纯化的方法。