阳离子交换介质吸附蛋白类型
㈠ 用于蛋白质提取分离的离子交换剂有哪些特殊的要求,主要有哪几类
离子交换层析根据带电强弱分为:强阳离子交换层析、强阴离子交换层析、弱阳离子交换层内析、弱阴离子交换容层析。填料的孔径也有分别,详细可以咨询各品牌代理商。
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㈡ 离子交换层析可以用于哪些蛋白质的分离
可以分为阳离子交换层析和阴离子交换层析。
阳离子交换层析,使用含有酸性基团版的阳离子交换树脂等,权可以结合待层析液中的阳离子,因而洗脱顺序是,正电荷越多结合越紧密洗脱越晚。
阴离子交换层析则使用含有碱性基团的交换树脂,结合溶液中的含有阴离子基团的分子,因而负电荷越多结合越紧密,洗脱越晚。
㈢ 蛋白质分离纯化的四种方法
1、盐析法:
盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。
2、有机溶剂沉淀法:
有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其一、与盐溶液一样具有脱水作用;其二、有机溶剂的介电常数比水小,导致溶剂的极性减小。
3、蛋白质沉淀剂:
蛋白质沉淀剂仅对一类或一种蛋白质沉淀起作用,常见的有碱性蛋白质、凝集素和重金属等。
4、聚乙二醇沉淀作用:
聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物可使蛋白质发生沉淀作用。
(3)阳离子交换介质吸附蛋白类型扩展阅读:
蛋白质是生命的物质基础,是有机大分子,是构成细胞的基本有机物,是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。
机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占人体重量的16%~20% ,即一个60kg重的成年人其体内约有蛋白质9.6~12kg。
人体内蛋白质的种类很多,性质、功能各异,但都是由20多种氨基酸(Amino acid)按不同比例组合而成的,并在体内不断进行代谢与更新。
㈣ 离子交换曾新与亲和层析两种转化分子力蛋白的哪种方法效果好
离子交换曾新与亲和层析两种转化分子力蛋白的哪种方法效果好
离子交换层析是利用离子交换剂上的可交换离子与周围介质中被分离的各种离子间的亲和力不同,经过交换平衡达到分离的目的的一种柱层析法.
该法可以同时分析多种离子化合物,具有灵敏度高,重复性、选择性好,分离速度快等优点,是当前最常用的层析法之一,常用于多种离子型生物分子的分离,包括蛋白质、氨基酸、多肽及核酸等.
离子交换层析对物质的分离通常是在一根充填有离子交换剂的玻璃交换剂的玻璃管中进行的.
离子交换剂为人工合成的多聚物,其上带有许多可电离基团,根据这些基团所带电荷的不同,可分为阴离子交换剂和阳离子交换剂.
含有预被分离的离子的溶液通过离子交换柱时,各种离子即与离子交换剂上的荷电部位竞争结合.
任何离子通过柱时的移动速率取决于与离子交换剂的亲和力、电离程度和溶液中各种竞争性离子的性质和浓度.
离子交换剂是由基质、荷电基团和反离子构成,在水中呈不溶解状态,能释放出反离子.
同时它与溶液中的其他离子或离子化合物相互结合,结合后不改变本身和被结合离子或离子化合物的理化性质.
离子交换层剂与水溶液中离子或离子化合物所进行的离子交换反应是可逆的.
假定以RA代表阳离子交换剂,在溶液中解离出来的阳离子A+与溶液中的阳离子B+可发生可逆的交换反应:RA+B+↔RB+A+;该反应能以极快的速度达到平衡,平衡的移动遵循质量作用定律.
㈤ 采用离子交换柱纯化蛋白时,洗脱采用的离子强度的大小范围应该如何确定
离子交换纯化是利用离子交换剂上的可解离基团(活性基团)对各种离子的亲和力不一专样人达到分离的目的的属一种分离技术。离子交换剂是含有若干活性基团 的不溶性物质,即在不溶性母体上引入若干可解离基团而成,根据引入解离基团的不同,可以分为阳离子交换剂和阴离子交换剂。各种离子对离子交换剂的亲和力各 不相同,亲和力随离子的价数与原子序数增加而增加,而随离子水化膜半径的增加而降低。对具体离子交换纯化,需要主要离子交换剂的选择和处理。洗脱不同蛋白 的最恰当的离子强度液不一定一样,通常采用浓度梯度和PH梯度相结合的方式洗脱,纯化不同的蛋白最好先摸一摸洗脱液的离子浓度和PH值……
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离子交换介质 http://proct.bio1000.com/100025/
㈥ 怎样使用离子交换析法分离不同的蛋白质
你好,离子交换内的介质一般是树脂,阳离子交换型的,使用前树脂先用碱处理成钠型。希望对你有所帮助。
㈦ 求设计一用离子交换法分离蛋白质的试验方案.
你的目标蛋白是什么?五中蛋白中应该只有一种才是目的蛋白,其余是杂质啊
例如阴离子版交换介质吸权附的是阳离子,即蛋白质处于一个PH比其自身等电点低的环境中。
装柱 氢氧化钠处理 磷酸盐缓冲液平衡 上样 吸附目标蛋白 流穿峰出现 磷酸盐缓冲液洗脱 不同离子强度的氯化钠洗脱(分段、梯度)
收集 检测蛋白质纯度含量等
㈧ 离子交换层析可用于哪些种类蛋白质的分离
离子来交换层析是利用蛋白质在不同自PH带不同种电荷的方法,利用离子交换的方法分离蛋白的。
离子交换内的介质一般是树脂,阳离子交换型的,使用前树脂先用碱处理成钠型,将氨基酸混合液(pH=2-3)上柱,pH=2-3时,氨基酸主要以阳离子形式存在,与树脂上的钠离子发生交换而被“挂”在树脂上,再用洗脱剂洗脱。不同的氨基酸(带的电荷不同)与树脂的亲和力不同,要将其分离洗脱下来,需要降低它们之间的亲和力,方法是逐步提高洗脱剂的pH和盐浓度,这样各种氨基酸将以不同的速度被洗脱下来,反之亦然。
不同反荷离子与树脂亲和力是不同的,其强弱关系为阳性竞争离子:Ag+〉CS+〉K+〉NH4+〉Na+〉H+〉Li+ 阴性竞争离子:I->NO3->(PO4)3->CN-〉HSO3-〉Mg2+〉HCO3-〉HCOO-〉CH3COO-〉OH-〉F- 如果某种离子溶液洗脱效果不好,可用另一种亲和力强的离子代替之,等电点>7选择阳离子交换树脂,等电点<7选择阴离子交换树脂。