离子交换柱设计
发布时间: 2020-12-15 08:48:14
㈠ 设计一个ph稳定范围已知的蛋白分离纯化实验,利用那个类型的离子交换柱
如果不限定纯化抄方法,可以考虑亲袭和层析或离子交换,但根据你问题的意思,是选定离子交换。
此时就要考虑你蛋白的等电点了,如果等电点在你稳定pH之上,就用阳离子交换柱:
设计阳离子交换层析:将你的样品置换到你所指的稳定pH的running buffer。同时装柱,平衡,然后上样,平衡,洗脱(因为你的pH不稳定,建议盐洗脱),收峰。得你的蛋白;
如果你的等电点在稳定pH之下,就用阴离子交换柱,其步骤如上,只是改变柱子类型。
㈡ 设计一个利用阴离子交换柱纯化一个等电点为7.5的蛋白质的实验
既然是阴离子交换,就要让目标蛋白带负电,那么缓冲液PH就要大于等电点。缓冲体系的选专择也很重属要,一般用TRIS-HCl,特别是弱阴离子柱不可选用带负电强的磷酸盐缓冲液,否则上样液中被交换的将是磷酸根而不是目标蛋白。一般用NaCl平衡后上样进行离子交换,然后再用较强的阴离子洗脱。
㈢ 实验室的离子交换柱如何设计啊
我们实验室是自己做的,用有机玻璃管做的,直径50MM,两个管接是车床做的,下面的管接里面垫上180#不锈刚网做隔离,水流是用管夹控制的。
㈣ 离子交换混床的设计步骤是什么
反洗分层,酸碱再生,气水混合,正洗,正常运行。工作原理就是阴阳树脂离子交换。
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