deae离子交换层析原理

① 询ESCO生物安全柜技术资料

esco 二级生物安全柜的详细介绍 1.按照en12469标准生产和检测 2.两块ulpa高效过滤器，针对0.12um颗粒系可以达到3.99.9999％截流效率 4.滑动式前窗，254mm工作高度 5.人性化搁手架设计，降低工作疲劳强度 6.底部台面分为若干小块，方便清洗 7.直面设计，两侧玻璃透明边窗 可选配置： ac2-uv 紫外灯 ac2-ss 760mm支架 ac2-po 柜内防溅电源插座 ac2-sv 各类阀门 技术指标： 1. 外部尺寸(长x宽x高) mm： ac2-3a1：1035 x 769 x 1345 ac2-4a1：1340 x 769 x 1345 ac2-5a1：1645 x 769 x 1345 ac2-6a1：1950 x 769 x 1345 2.内部尺寸(长x宽x高) mm： ac2-3a1：965 x 540 x 630 ac2-4a1：1270 x 540 x 630 ac2-5a1：1575 x 540 x 630 ac2-6a1：1880 x 540 x 630 3.截留效率：99.9999% (针对0.12um颗粒系) 4.噪音标准：低于60dba 离子交换层析根据化合物的净电荷进行分离。带负电荷或正电贺的官能团共价结合于固相载体基质，分别成为阳离子交换剂和阴离子交换剂。主要有以下几大类：1、unosphere 离子交换介质；unosphere 离子交换介质是为满足生物制药界对具有更高生产能力层析的需要而设计的。unosphere 是新一代的亲水聚丙烯酰胺多聚载体，有一步聚合而成，具有高结合能力和低背压的特点，从而可提供更高的生产能力。一步聚合法生产的载体具有无可比拟的品质和批间稳定性。主要特性：适合在背压2 bar ，线性速度1200 cm/hr 下运行；在1m 的naoh 中，仍能保持10000 小时稳定性。 2、macro-prep 离子交换介质；macro-prep high q, deae, high s, 和cm 层析介质。macro-prep 25s和25q 层析介质。macro-prep 离子交换介质满足了分析型、半制备型和工业化应用的要求。它是刚性的大孔疏水介质，具有很好的载量、分辨率和通量，且化学和机械性能稳定。3、分析纯离子交换树脂；ag分析纯树脂；bio-rex 树脂；chelex 树脂；4、分子生物纯与生物工艺纯树脂；ag 50w-x8 强阳离子交换树脂；ag 501-x8 混合床树脂；chelex 100 分子生物纯树脂；生物工艺纯树脂；5、预装离子交换柱；econo-pac 离子交换滤柱6、预装poly-prep 离子交换柱；预装poly-prep 柱，用于重力流层析样品制备和其它小规模试验。7、uno monolith 离子交换层析柱；8、aminex hplc 柱由聚苯乙烯二乙烯苯树脂填装而成的aminex hplc 柱。9、离子交换层析标准品10、有机酸标准品11、碳水化合物标准品

② DEAE-52离子交换层析中怎样确定Nacl浓度范围

要是没有任何文献来报源道过的，预试验建议作全部的0%-100%，然后看最后的OD值合并峰值附近的收集液SephadexG-25除盐，然后测定活性，确定你要收集的峰。这样肯定不会漏掉你要的峰。然后你就可以重复实验了。

③ 请问羧甲基纤维素和DEAE纤维素分离蛋白有什么区别

羧甲基纤维素是弱阳离子交换填料，要求使用时的pH值要低于目的蛋白质等电点起码0.5个pH值单位，为了达到较好的分离效果，实际使用时最好是低于1个以上pH值单位。在低pH值下，有的不耐酸的杂质蛋白质会变性，届时离心除去，可首先去除一部分杂质蛋白质。
DEAE纤维素是弱阴离子交换层析填料，要求使用时的pH值要高于目的蛋白质等电点起码0.5个pH值单位，为了达到较好的分离效果，实际使用时最好是高于1个以上pH值单位。大多数蛋白质的等电点在6.0左右，可以耐受8.0，所以依据pH提高使得某些杂质蛋白质变性的做法多数情况下不可行。
这两种填料的工作pH值不同，但都可以用氯化钠来洗脱。交换基团不同，分离效果也不同，可以先用一种来纯化，得到初步纯化的产物之后再用另一种来纯化。因为有些蛋白质不能耐受酸，所以我建议先用羧甲基纤维素弱阴离子交换层析，再用DEAE纤维素弱阳离子交换层析，产物的纯度比单用一种时更高。
在对蛋白质的破坏方面，弱交换填料比强交换填料好，有的蛋白质用强离子交换来纯化，蛋白质结合再交换之后会损失很多活力，但是弱离子交换则损失的活力较少。但是弱离子交换的分辨率比强离子交换差一些。如果纯化得不好，又有强离子交换的，就试一下吧。lxj341401(站内联系TA)一个是阳离子交换填料，一个是阴离子交换填料，用哪个跟蛋白值的等电点pI还有所用缓冲液的pH有关，pH>pI时带负电荷，蛋白质能吸附到阴离子交换填料，相反的用阳离子交换。所以能不能代替看具体情况了。悦迷008(站内联系TA)Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-15 06:00:21:
这两个填料虽然都是离子交换用的，但一个是弱阴一个是弱阳，效果不同，没有一个能代替另一个的说法。

④ 在蛋白质纯化中，除了离子交换层析之外，还有哪些常用的柱层析方法纯化蛋白质

在蛋白质纯化中，除了离子交换层析之外，还有哪些常用的柱层析方法纯化蛋白质
离子交换层析是根据蛋白质所带电荷的差异进行分离纯化的一种方法.蛋白质的带电性是由蛋白质多肽中带电氨基酸决定的.由于蛋白质中氨基酸的电性又取决于介质中的pH,所以蛋白质的带电性也就依赖于介质的pH.当pH较低时,负电基团被中和,而正电基团就很多; 在pH较高时,蛋白质的电性与低pH时相反.当蛋白质所处的pH,使蛋白质的正负电荷相等,此时的pH称为等电点.离子交换层析所用的交换剂是经酯化、氧化等化学反应引入阳性或阴性离子基团制成的,可与带相反电荷的蛋白质进行交换吸附.带有阳离子基团的交换剂可置换吸附带负电荷的物质,称为阴离子交换剂,如DEAE-纤维素树脂;反之称为阳离子交换剂,如CM-纤维素树脂.不同的蛋白质有不同的等电点,在一定的条件下解离后所带的电荷种类和电荷量都不同,因而可与不同的离子交换剂以不同的亲和力相互交换吸附.当缓冲液中的离子基团与结合在离子交换剂上的蛋白质相竞争时,亲和力小的蛋白质分子首先被解吸附而洗脱,而亲和力大的蛋白质则后被解吸附和洗脱.因此,可通过增加缓冲液的离子强度和/或改变酸碱度,便可改变蛋白质的吸附状况,使不同亲和力的蛋白质得以分离.

⑤ DEAE-纤维素离子交换层析法可用于分离纯化蛋白质，主要是由于：

答案D
分配层析利用样品各组分在固定相和流动相间溶解度的不同内(分配系数不同)来进行分离；容吸附层析法利用吸附剂表面对样品组分吸附能力强弱不同来进行分离；亲和层析由于配体与待分离物质进行特异性结合；DEAE-纤维素离子交换层析法利用样品组分对离子交换剂静电力的差异来进行分离。

⑥ 用过的sephadex G-25层析柱和DEAE纤维素离子交换柱再生的方法为什么不一样

飞秒检测发现sephadex G-25层析柱填料是葡聚糖交联的凝胶柱，G-X, X：（1）交联度。X越小，交联度越大，网孔越小，适用于分离低分子量产品，反之亦然。（2）吸水量。为凝胶得水值的10倍.例如,G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克.凝胶柱使用一次后，必须反冲疏松一次，平衡后再使用。若使用数次，就需要再生处理。用0.1mol/L NaOH-0.5mol/L NaCl溶液浸泡，然后用蒸馏水洗至中性备用。若实验完毕，将再生后的凝胶在布氏漏斗上用蒸馏水洗涤抽干，再用95%乙醇洗两次，在60℃烘箱中烘干，回收保存。
DEAE-纤维素为二乙氨乙基纤维素，是阴离子交换剂。基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。离子交换层析中，基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂；而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点，当蛋白质处于不同的pH条件下，其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质，所以这类蛋白质被留在柱子上，然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施，将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质，结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。离子交换剂的再生与保存离子交换剂可在柱上再生。如离子交换纤维素可用2mol/：NaCl淋洗柱，若有强吸附物则可用0.1mol/LNaOH洗柱；若有脂溶性物质则可用非离子型去污剂洗柱后再生，也可用乙醇洗涤，其顺序为：0.5mol/LNaOH-水-乙醇-水-20%NaOH-水。保存离子交换剂时要加防腐剂。对阴离子交换剂宜用0.002%氯已定（洗必泰），阳离子交换剂可用乙基硫柳汞（0.005%）。有些产品建议用0.02%叠氮钠。
两种填料的抗酸碱性和抗腐蚀性能不同。

⑦ 7.下列关于用离子交换纤维素色谱法分离蛋白质原理的叙述哪一个是正确的

答案D
分配层析利用样品各组分在固定相和流动相间溶解度的不同专(分配系数不同)来进行分离；吸附属层析法利用吸附剂表面对样品组分吸附能力强弱不同来进行分离；亲和层析由于配体与待分离物质进行特异性结合；DEAE-纤维素离子交换层析法利用样品组分对离子交换剂静电力的差异来进行分离。