发酵液过滤工艺设备在生产中的应用
㈠ 发酵液提取工艺有哪些,比较常用的
、目标物的提取是采用物理或化学手段从发酵液或菌丝体中得到目标物的浓缩液专或粗制品。常用的属提取方法有
溶媒萃取法、
离子交换法、
吸附法以及沉淀法。
具体采用何种提取方法需结合目标物化学结构特征、产品组份情况、拟采用的终产品精制工艺终产品质量要求以及对终产品安全性的影响等因素综合考虑。
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㈡ 生物医药中发酵液体水分离纯化主流工艺是什么
生物技术制药包括复基因工程制制药、细胞工程制药、酶工程制药和发酵工程制药等几大类。
基因工程制药的工艺流程可分为以下几步
1.目的基因的获得:这可通过多种方法获得,如反转录法、鸟枪法、化学合成或由已有基因来改造。
2.目的基因与载体的结合:构建工程菌这时要注意载体必须符合以下要求①有多个克隆位点②有较强的启动子和终止子③能够独立复制。
3.发酵培养:即在发酵罐中培养 。
4.外源目的基因的表达 。
5.外源表达产物的纯化分离:分离一般也要以下步骤①细胞破碎、固液分离、浓缩、初步提纯和高度提纯;②细胞工程制药,分动物细胞制药和植物细胞制药。目前动物细胞制药主要制取单抗、疫苗。植物细胞制药主要是为获得植物细胞的此生代谢产物。
㈢ 寻采用不同比例的淀粉的发酵液培养枯草芽孢杆菌进行发酵最佳工艺
实验菌种
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtillis)1.210;D53、D56:从活性污泥中分离得到。
培养基的配制
斜面培养基(营养琼脂):蛋白胨1%,NaC1 0.5 D/0,牛肉膏0.3%,琼脂2%。液体营养肉汤培养基:蛋白胨1%,NaC1 0.5%,牛肉膏0.5%。
淀粉酶试验培养基:在营养琼脂培养基中加2%的可溶性淀粉即成。
以上3种培养基的pH值均为7.2~7.4,分装后121℃灭菌20min。
产淀粉酶发酵培养基:玉米粉8%,蛋白胨0.5%,豆饼粉4% ,K~HPO 5% ,(NH4)2SO 0.4% ,pH值自然,0.05MPa灭菌20min。
试剂与仪器设备
试剂:革兰氏染色染色试剂,Taq E,dNTPs(4种脱氧核苷三磷酸),6x loading Bufer,50x TAE(用时稀释成lx TAE),引物片断:27f5’一agagttgatcctggctcag一3’,1492r5’.ggttaccRgttacgacf一3’,引物浓度:1OD稀释至10001~L,琼脂糖,Goldview(用于替代EB的染料),D2000 DNA Maker。
仪器与设备:DYY.III33B型电泳槽,MJResearch.PTC.200PCR仪,灭菌锅,离心机,37% 恒温培养箱,水浴锅。
取样、富集培养
取样时将水和污泥一起取来,静置使污泥沉降,待污泥沉降后直接用灭菌过的移液管吸取1.0mL上清液,注入无菌水中,稀释适宜的倍数,以无菌操作注入固体培养基平板中。倒置放入生化培养箱中,37%富集培养24h-36h。
菌种的鉴定
形态学观察:取少量菌种制成玻片,通过革兰氏染色,在显微镜下观察菌落形态特征。生理生化鉴定:根据《常见细菌系统鉴定手册》进行鉴定。16SrRNA同源性比较:取菌株D53、D56的48h的平板培养物为模板,配制50 L地体系,进行PCR扩增。
PCR反应体系:ddH2O 381~L,10×Taq E Bufer 5 L,dNTPs(2.5mmol/L)41~L,引物1(27D1 L,引物2(1492r)1IxL,离心混匀,分装。再分别加入模DNA O.5 L,TaqE(5U/~L)0.51xL,离心混匀。
制胶:l%琼脂糖(1g琼脂加100mL 1×TAE(电泳缓冲液)),再在lOOmL琼脂糖中加1 L~2 LGoldView。
电泳缓冲液:l×TAE倒入电泳槽中直至没过胶面并高出3~5mm。
点样:6xLoadingBufer(点样缓冲液)llxL,DNA51xL。
电泳:点好样后,设定电泳条件:电压150V,30min。
PCR反应条件:94℃、5min;(94℃、1min;52℃、1min72℃、2min)25个循环;72℃、10min,4℃ 保温。
PCR产物经脱盐纯化后,由北京华大中生科技发展有限公司进行测序,要求双向测通,将拼接后的测序
结果输入、 州.NCBI.nlm.nih.gov,利用BLAST软件,将测定得到的基因序列与Genbank数据库的序列作比对分析,进行同源性比较。
分离菌株的产淀粉酶透明圈试验
按参考文献[8]方法分别将D53、D56斜面菌株接入养肉汤液体培养基的试管中,37%培养24h后,分别划
线接种于淀粉酶试验培养基中,作2个平行。通过稀释菌液以使在平板上出现单菌落。将接好的平板置于37~C恒温培养箱中培养24h,取出后分别滴加现配制的路哥氏碘液,全部漫过平板,放置片刻,即可对其透明圈进行观察和测量。
菌株产淀粉酶粗酶活的测定
酶活力定义:lmL酶液于60%、pH6.0的条件下,在1h内催化2%可溶性淀粉成为糊精的克数为1个酶活
力单位。
将保存在斜面的菌株,分别接入发酵培养基中,37%、200r/min培养44h后,分别取发酵液测定酶活。
㈣ 液体深层发酵工艺
液体深层发酵如果选用性能优良的菌株、工艺优化好,生产出来的菌种含量也是非常高的,成本不一定比固态发酵高,还是看技术控制。
㈤ 纤维素酶的固体发酵和液体发酵在生产工艺上有什么区别,急急急!知道的帮个忙!
固体发酵是以固态底物作为培养基,一般水分含量在40%~50%间,液体发酵则是以液态培养基为主,经液态发酵罐进行深层发酵的方法,一般液态发酵培养基的总固形物在5%~10%之间。yueyan
㈥ 纤维素酶的固体发酵和液体发酵在生产工艺上有什么区别,知道的帮个忙!
固体发酵是以固态底物作为培养基,一般水分含量在40%~50%间,液体发酵则是以液态培养基为主,经液态发酵罐进行深层发酵的方法,一般液态发酵培养基的总固形物在5%~10%之间.yueyan
㈦ 我想用糖蜜发酵液做液体冲施肥,求高人指点配方和工艺!
该方法采用酵母生产过程中的酵母发酵液废液为原料,将废液喷雾干燥后得到粉回体答酵母有机原料,同时利用稻壳粉吸附发酵的枯草芽孢杆菌和胶胨样芽孢杆菌后,按比例混合吸附后的单一菌剂,将混合后的菌剂按比例加入到酵母有机原料中,同时加入无机肥料,混合后得到多营养生物冲施肥。
㈧ 发酵液分离纯化的一般工艺流程
粗提取——
硫酸铵分级沉淀——
透析脱盐——
乙醇分级沉淀——
离子交换层析
㈨ 白酒中,固态法酿造和液态法有什么区别吗
固态法白酒是指在蒸煮、糖化、发酵、蒸馏等主要过程中采用固态基质形态生产出的专白酒。传统属固态法白酒生产是采用高粱、大米、糯米、玉米、小麦等原料,固态糖化发酵,开放式生产,自然微生物接种制曲,甄桶蒸馏,陶坛或酒海储存陈酿等一系列独特的工艺和设备酿制而成。
液态法白酒是液态发酵法白酒。液态法白酒是以粮谷、薯类、糖蜜等原料,经液态发酵、蒸馏成食用酒精的工艺路线、再经串香、勾兑、调配而成的白酒。有调香法、串香法和固液结合法,或者相互移植、渗透而生产的多种工艺。
由于液态法白酒的工艺先进,所以又有新工艺白酒之称,它是采用现代化的酒精;产出符合质量标准的酒精,再加工或改制成的白酒。液态法白酒与固态法白酒一样,同属饮料酒范畴,是可以饮用的。