树脂层析柱
⑴ 哪个厂家做层析柱,树脂柱设备好
焊接技术与工程专业是一门集材料学、工程力学、自动控制技术的交叉性学科,教内学以培养多学科容知识的综合运用为基础,进行工程师的基本训练。本专业是国内唯一的焊接专业,学生经培训考试合格后,还可获得国际焊接工程师证书(IWE)。
⑵ 1、若装好的层析柱的树脂中有气泡,会对后续分离实验产生怎样的影响
装好的层析柱的树脂中有气泡,后续分离实验的纯度将会受到严重的影响。
层析柱的树脂中回有气泡,在分离实答验时,会导致沟流的出现,也就是说,在气泡附近,液体直接顺着气泡壁短路,流到下面去了,而不会经过树脂的吸附了。气泡比较多的情况下,将会使色谱的分离效果大大下降,拖尾严重。甚至分不开。
因此在装填树脂时,必须使用脱气的水来浸泡树脂,防止树脂中产生气泡,导致柱效严重下降,甚至使层析柱失去层析效果。
⑶ 做Ni-NTA树脂纯化蛋白时时没有层析柱怎么办可以用其他的什么东西代替柱子吗
(2) 与三价金属离子螯合剂亚氨基二乙酸制成的Ni-IDA-琼脂糖相比,Ni-NTA-琼脂糖的非回特异性吸附明显答减少,可让使用者获得更高纯度的目标蛋白
(3) 支持变性包涵体蛋白的柱上复性,起到分离、复性同时进行的效果
(4) 可耐受溶液中更高浓度的还原试剂(β巯基乙醇最高可用到20mM)。
(5) 琼脂糖基质在pH 3-12的范围内保持稳定,可以耐受反复的在位清洗(CIP)。
(7) 可以反复使用和再生5-10次. 基质: 带有Ni2+高度交联的6%琼脂糖; 平均颗粒大小: 90um; 动态结合载量: Breakthrough capacity at 10%,150 cm/h:大约40 mg histidine-tagged 蛋白质/ml 填料; 金属离子载量: 大约 15 µmol Ni2+/ml 填料; 化学稳定性: 40°C 放置一周: 0.01 M HCl, 0.1 M NaOH 12 h: 1 M NaOH, 70% 乙酸30 min: 30% 2-异丙醇1 h: 2% SDSpH稳定性:3-12 Store:2-8°C
⑷ 大孔吸附树脂与硅胶柱的原理
大孔吸附树脂是一类不含交换基团且有大孔结构的高分子吸附树脂,具有版良好的大孔网状结权构和较大的比表面积,可以通过物理吸附从水溶液中有选择地吸附有机物即非极性或极性较弱的物质,具有物理化学稳定性高、比表面积大、吸附容量大、选择性好、吸附速度快、解吸条件温和、再生处理方便、使用周期长、宜于构成闭路循环、节省费用等诸多优点。树脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附质) 之间的范德华引力,通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作,使有机化合物根据有吸附力及其分子量大小可以经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的。
硅胶柱的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离, 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。其中有微孔,对不同化合物的吸附能力不同,然后选用适当的洗脱剂进行洗脱从而达到分离。
⑸ 层析柱中固定相如何选择
、高效液相层析法 高效液相层析法(High Performance Liqiud Chromatography; HPLC)是用特制微粒(<10um)充填的层析柱作为固定相,通过高压使液体流动相快速通过层析柱而达到快速有效分离液相中各种物质的层析技术。它具有分离效果好、分析速度快,检测灵敏度高等特点。在医药卫生和生物化学中得到广泛的应用,蛋白质、糖类、核酸、氨基酸、生物碱、类固醇和类脂等大分子以及高分子聚合物都能用HPLC测定。 典型的高效液相色谱仪包括输液系统、进样分离系统、检测系统和数据处理系统等部分组成。流动相用一高压泵输入,由于流动相液体中常溶有微量气体,脱去其中气体是很有必要的。在分离过程中按一定程序连续改变流动相的离子强度、pH和极性,以改变分离条件、提高分离效果、缩短分离时间,因此,需要两台高压泵。进样可以是注射器进样,也可以是进样阀进样。HPLC使用的检测器不少,但商品化的还不多,应用最多的是紫外或紫外-可见分光检测器,还有荧光检测器、示差检测器和电化学检测器等。 (一)方法原理 1.液固吸附层析法 在色谱柱中填充固体吸附剂,待测组分通过色谱柱时,不断地被吸附剂吸附和被流动相解吸附。基于不同组分非被吸附和被解吸附的行为差异,从而达到分离的目的。常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、弗罗里硅土等。 2.液液分配层析法 系在固体填充颗粒上涂上一层薄薄的固定液,待测组分在固定相和流动相之间进行连续的分配萃取,由于被分离物质在两相间的分配系数不同而达到分离目的。 3.离子交换层析法 在色谱柱中填充离子交换树脂。带电离子随流动相经色谱柱时,与带有异性电荷的树脂有一定的亲和力而得以适当保留。由于各种离子与树脂的亲和力不同,其保留行为也不同,从而得以分离。 (二)临床应用 高效液相层析法是目前最好的血药浓度监测方法,但在实际应用中还存在一些问题,如每遇到一个新药必须摸索测定的最佳条件;各种药物的测定条件不同,要不断的更换流动相甚至色谱柱;每次只能测定一种药物,至多只能测定一类药物,无法测定性质不同的药物。因此,高效液相层析法用于常规血药浓度监测,只适用于少量常用的某些特定药物,大大限制了它的推广应用。鉴于临床的需要,国外一些公司设计了自动高效液相色谱仪,该仪器具有如下优点:①固定色谱柱和流动相,使一台仪器适合多种药物的检测。②利用计算机技术,储存几百种药物的图谱,能自动识别未知药物。③为提高图谱鉴别能力,该机利用了三维光谱、出峰时间等多种手段。④自动进样系统使仪器自动定量或定性测定,分析多达50个样品。高效液相色谱
⑹ D101大孔树脂怎么装柱
3.操作方法〔1~3〕:
3.1.装柱:将D101大孔吸附树脂用丙酮浸泡过夜(大约15~18h),用水浴回流8h,过滤(或抽滤),用水洗至溶液:水(1∶2)不产生混浊为止,浸泡在水中,再进行装柱,并在柱顶加少量氧化铝,制成预处理柱,备用。
3.2.样品预处理:精密吸取样品5ml(固体样品制成相当浓度的溶液),加入已处理好的D101大孔树脂层析柱中,用100ml水洗脱(含蔗糖样品用300ml水),洗液弃去(流速1.5ml/min)。再以原流速用30ml无水乙醇分次洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣用无水乙醇溶解,定量转移至5ml容量瓶中,稀释至刻度,作为供试品溶液。
3.3.标准曲线制备:精密吸取绞股蓝皂甙标准液0、20、40、60、80μl,于10ml具塞试管中,在水浴上挥干溶剂,精密加入5%香草醛冰醋酸溶液0.5ml,高氯酸1.5ml,混匀。于60℃水浴上加热15~20min,冰水浴冷却,加入5.0ml冰醋酸,摇匀,以相应的试剂为空白,于545nm处比色测吸光度。
3.4.样品测定:精密吸取供试品溶液100μl,置具塞试管中,按3.3.项下方法进行,测出吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中绞股蓝皂甙的重量。
⑺ 树脂柱和层析柱一样吗
层析柱是凝胶抄层析技术中的主体,袭一般用玻璃管或有机玻璃管。凝胶过滤层析是利用一定大小孔隙的具有网状结构的凝胶作层析介质(如葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)
而树腊吸附柱;通俗的说,就是一种装载(阳、阴)离子交换树脂的设备,简称离子交换(柱)器,目的是离子交换树脂“吸附”水中阳离子或阴离子等盐类物质,当离子交换树脂吸附饱和后,就需再生处理,以恢复树脂交换(吸附)能力。
所以不同
⑻ 离子交换柱层析中树脂为什么中性
离子交换柱层析中树脂为什么中性
1离子交换树脂性能降解原因
树脂在长专期使用中,性能会逐属渐下降,表现为出水(即产品)质量降低。影响树脂性能降解的因素很复杂,如树脂体积减少,交换能力下降,球粒裂纹增多,破碎流失等,造成上述现象的原因不外是:
(1)胀缩内应力不均。在使用中树脂内部由于溶胀及收缩变化的不均匀,局部结构中应力不平衡,造成断链裂解。
(2)氧化破坏。体系中的氧化剂,包括酸、碱、溶剂等对树脂骨架及功能基的破坏。
(3)杂质污染。水中杂质堵塞了树脂的内部孔道,阻挡交换吸附。
2离子交换树脂使用前为什么要进行预处理
新树脂常含有反应溶剂、未参加反应的物质和少量低分子量的聚合物、铁、铅、铜等杂质。当树脂与水、酸、碱或其它溶液相接触时,上述可溶性杂质就会转入溶液中,在使用初期污染出水水质。因此,新树脂在投运前要进行预处理,转换为指定的离子型式。
⑼ 柱床体积怎么理解层析柱的直径是40mm,高为725mm,要加入的树脂的量是600ml。请大侠们指教
装填树脂的体积就是你的柱床体积
⑽ 层析柱的中压分离层析柱操作方法
以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例 以一定比例的石油醚一丙酮为洗脱液,60ML/MIN的流速进行梯度洗脱,柱的使用压力为2~ 3KG/C 。按每份500ML收集,TLC检识展开剂丙酮一氯仿(2:8),显色剂5%香草醛浓硫酸乙醇液
至洗脱完全,相同流份合并,回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加人适量甲醇热溶后自然放置,析出结晶,为冬凌草甲素。 取适量冬凌草甲素对照品及由上述方法得到的冬凌草甲素样品甲醇溶解后点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿一丙酮(8:2)为展开剂进行展开,5% 香草醛浓硫酸乙醇液显色,于105。C烘至斑点清晰。表明在该展开系统下,冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的RF值,并呈现出同样的蓝绿色斑点,在制备的冬凌草甲素样品中,没有杂质斑痕。 注册号 国食药监械(进)字2009第1400388号 生产厂商名称(中文) 产品性能结构及组成 产品主要组成:层析柱由层析柱体、填充剂和密封栓组成。柱体为不锈钢材质;填充剂为异丁烯酸酯合成物形成的亲水聚合物约0.6mL;密封栓由聚醚醚酮树脂(PEEK)组成。 产品适用范围 该产品用于对血液中不同的糖化血红蛋白进行分离。 注册代理 希米科医药技术发展(北京)有限公司 售后服务机构 爱科来国际贸易(上海)有限公司 批准日期 2009.02.26 有效期截止日 2013.02.25 生产厂商名称(英文) ARKRAY Factory, Inc. 生产厂地址(中文) 1480 Koji, Konan-cho, Koka, Shiga, JAPAN 生产场所 1480 Koji, Konan-cho, Koka, Shiga, JAPAN 生产国(中文) 日本 产品名称(中文) 层析柱 产品名称(英文) COLUMN UNIT 规格型号 HS-VII 产品标准 进口产品注册标准YZB/JAP 0057-2009《层析柱》