超薄切片环氧树脂
『壹』 石蜡切片技术和超薄切片技术有什么区别
石蜡切片(paraffin section) 组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。
超薄切片技术由于电镜产生的电子束穿透能力很弱,必须把标本切成厚度小于0.1um以下的薄片才适用,这种薄片称为超薄切片。常用的超薄切片厚度是50-70nm。在透射电镜的样品制备方法中,超薄切片技术是最基本、最常用的制备技术。超薄切片的制作过程基本上和石蜡切片相似,需要经过取材、固定、脱水、浸透、包埋聚合、切片及染色等步骤。
『贰』 哪些树脂不能用于冷冻超薄切片,哪些树脂适用于冷冻超薄切片,请举例
哪些复树脂不能用于冷冻超薄切制片,哪些树脂适用于冷冻超薄切片,请举例?
A:Epoxi不能用于冷冻超薄切片,Acrylate适用于冷冻超薄切片。
备注说明:Super Glue的成分是Cyan Acrylate,是预配好的,接触空气中的水分子,即可固化聚合;Acrylate树脂需要另配,并在一定条件下才能聚合。
『叁』 polymer样品,在冷冻超薄切片情况下,发生切几片没片子,再切,出一张切片,这是什么原因
冷冻超薄切片技术是一种为了研究更接近于生物生活状态结构和功能而 发展起来的电镜样品制
『肆』 如何制备橡胶材料的tem超薄切片
制备橡胶材料的tem超薄切片,是按木头的旋切方式,制作旋切设备!!
『伍』 橡胶样品,已树脂包埋,要做超薄切片。怎么切
所用的包埋树脂是Epoxi,不能在低温下切,而被包埋的橡胶样品,又必须在低温下切,因此建议该橡胶样品不包埋,直接切片
『陆』 超薄切片技术有哪些不能做的样品
样品为以下成分的,不能用超薄切片技术,因为钻石刀上的C原子会进入样品该元素当中
『柒』 超薄切片机可以切离子交换树脂吗 急等!!!
可以切的,里面有碎的
『捌』 超薄切片技术操作过程是什么
观察病毒在细胞组织内的状态,可采取超薄切片技术,将标本用固定液固定后,经过脱水渗透包埋聚合切片等过程,切成薄片然后染色检镜。
(1)固定。
常用的固定液主要有锇酸固定液、醛固定液、高锰酸盐固定液等。
①锇酸固定液:这是最常用的固定液,作用迅速,新鲜的锇酸呈浅黄色,其蒸气极毒,使用时应在强通风柜中把装有锇酸的安瓿瓶在缓冲液内敲碎。
②醛固定液:植物材料具有厚壁,锇酸固定液不能很好渗透,有时固定得不好。而醛固定液往往可获得较好效果,同时还不会破坏酶的活性,可以在切片上进行组织化学测定。常用的有甲醛固定液和戊二醛固定液。
③高锰酸盐固定液:此种固定液可保持膜的结构,但破坏核糖体并失去酶的活性,对维持TMV粒子在细胞内的排列比戊二醛及锇酸固定液好。
缓冲液可用1%液体锇酸和1%过锰酸钾,也可用磷酸盐巴比妥-醋酸和二甲胂酸盐缓冲液。固定可在0~5℃或室温下进行,供试材料尽可能使用幼嫩的植株,小的根可整个固定,叶片需剪成1~2cm的小块。叶中的空气会阻止固定液与大部分细胞接触,可在真空下把空气除去。
组织固定后必须彻底冲洗,在进行锇酸固定前要把多余的醛用缓冲液冲洗彻底。固定后的组织一定要进行脱水,特别是采取不溶于水的树脂包埋时,在室温低于4℃时,丙酮或乙醇脱水效果都很好。
(2)包埋。
包埋用的树脂可分为四类,即甲基丙烯酸酯、环氧树脂、聚酯树脂和各种水溶性化合物。
甲基丙烯酸酯在聚合过程中可能引起组织损伤,在电子束轰击下,这种介质有升华的趋向,引起细微组织结构的破坏。但甲基丙烯酸酯也有优点,它比环氧树脂能切出较大的切块切面,切片也容易染色。
环氧树脂和聚酯树脂是保存细胞细微结构的最好包埋材料,目前最常用的环氧树脂是Epon和Araldite,用它包埋的标本可避免聚合损伤,树脂切片在电镜下不升华,可使标本连续观察,并保存细微结构。
水溶性树脂剂对一些不希望用有机溶剂脱水,或利用组织切片做酶外处理试验特别有用,其缺点是不能很好地保持细胞的细微结构。
组织需在包埋介质中充分渗透,常用的有两种方法:
①环氧树脂包埋组织的渗透。将丙醇脱水的组织转到装有6ml由等量丙酮和环氧树脂的标本管中,将标本管放在烤箱内由倾斜45°角的马达带动的轮上,使其不断转动,丙酮由开口的管中蒸发,当丙酮味消失后,将组织在擦镜纸上吸干,浸入新鲜的树脂中,再于同一温度下放4h,再一次吸干组织后,移到装有新鲜树脂的胶囊内,将Epon块放在40℃下,直至完全变硬,并继续在60℃下凝固12h。
②水溶性树脂包埋组织的渗透。将组织在戊二醛中固定,在缓冲剂中冲洗1~12h,然后在80%GMA单体和20%的水中脱水20min,再于97%GMA单体和3%的水中继续脱水20min后,在制备的聚合混合物中渗透过夜。将组织放在烘炉内的明胶胶囊中,注满聚合混合物除去所有空气泡,盖好使其不使与空气接触,把胶囊用金属丝垂直吊起,用长波长的紫外光聚合1~3d即可。
(3)切片。
切片前切去埋块四周的树脂,留下高2~3mm的标本正方柱,装入切片机,使埋块面的平行边与刀口平行,把刀慢慢向标本推进,通过切片机上的目镜系统,把刀推到看不到有间隙之处,每次推进0.5~1.0μm,直到切下切片。切片厚度以能达到浮于液面的切片呈灰色为最好。切片可用醋酸双氧铀和柠檬酸铅进行染色。染色后的切片在0.1N氢氧化钠中冲洗,然后用水冲洗。
『玖』 石蜡切片技术和超薄切片技术有什么区别求答案
石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。
超薄切片技术由于电镜产生的电子束穿透能力很弱,必须把标本切成厚度小于0.1um以下的薄片才适用,这种薄片称为超薄切片。常用的超薄切片厚度是50-70nm。在透射电镜的样品制备方法中,超薄切片技术是最基本、最常用的制备技术。超薄切片的制作过程基本上和石蜡切片相似,需要经过取材、固定、脱水、浸透、包埋聚合、切片及染色等步骤。