lb培养基用蒸馏水

A. LB培养基如何配制

以配制一升培养基为例：

应该在950 ml去离子水中加入:

胰蛋白胨10g

酵母提取物5g

NaCl 10g

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配置原则：

1、选择适宜的营养物质
就微生物主要类型而言，有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类及病毒之分，培养它们所需的培养基各不相同。

在实验室中常用牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)培养细菌，用高氏I号合成培养基培养放线菌，培养酵母菌一般用麦芽汁培养基，培养霉菌则一般用查氏合成培养基。

2、营养物质浓度及配比合适
培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需，浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用。

另外，培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累，其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲，碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。

3、控制pH条件

培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的最适pH条件各不相同，一般来讲，细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。

值得注意的是，在微生物生长繁殖和代谢过程中，由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累，会导致培养基pH发生变化，若不对培养基pH条件进行控制，往往导致微生物生长速度下降或(和)代谢产物产量下降。

4、控制氧化还原电位(redox potential)

不同类型微生物生长对氧化还原电位(F)的要求不一样，一般好氧性微生物在F值为+0.1V以上时可正常生长，一般以+0.3一+0.4V为宜，厌氧性微生物只能在F值低于+0.1V条件下生长，兼性厌氧微生物在F值为+0.1V以上时进行好氧呼吸，在+0.1V以下时进行发酵。

5、原料来源的选择

在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分，特别是在发酵工业中，培养基用量很大，利用低成本的原料更体现出其经济价值。

6、灭菌处理

要获得微生物纯培养，必须避免杂菌污染，因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言，更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌，一般培养基用1.05kg/cm2，121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。

在配制培养基过程中，泡沫的存在对灭菌处理极不利，因为泡沫中的空气形成隔热层，使泡沫中微生物难以被杀死。因而有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生，或适当提高灭菌温度。

B. 合成培养基中蒸馏水的作用是什么

任何生命的生存都离不开水啊！水可以保证生命体的正常代谢参加一些反应，维持渗透压，给各种生化反应提供条件。

C. LB培养基配方

LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求.可分为液体培养基和固体培养基。

液态培养基
根据《分子克隆实验指南》（J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔著）配制每升培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
胰蛋白胨10g
酵母提取物5g
NaCl 10g
摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌21min.
培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌.通过培养工程菌,我们可以表达大量的外源蛋白,也可以拿到带有外源基因的质粒,工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础。

LB培养基的配方如下:

胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L
氯化钠(NaCl) 10g/L
另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4(该pH适合目前使用最广的原核表达菌种E.coli的生长)

固态培养基
LB固体培养基1L和液体一样，加15g~20g琼脂粉，一定要在温度降下之前加好抗生素，并且倒好板。

D. PH6.1的LB液体培养基的配制

1．称量：准确称取各成分。蛋白胨0.5g，酵母提取物0.25g，氯化钠0.5g，加水50ml。配置LB固体培养基时还需加1g琼脂。

2．溶化：加热熔化，用蒸馏水定容到50mL。配置LB固体培养基时还需加琼脂，整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。

3．调pH：将pH调至6.1。

4．灭菌：在两个250ml的三角瓶中分别装入50ml LB液体培养基和50ml LB固体培养基，加上棉塞。将培养皿用牛皮纸包好，放入灭菌锅内，1kg压力灭菌15min。

5．倒平板：灭菌后，待固体培养基冷却至60℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是：

①将灭过菌的培养皿放在火焰旁，右手拿装有培养基的三角瓶，左手拔出棉塞；

②右手拿三角瓶，使三角瓶的瓶口迅速通过火焰；

③用左手将培养皿打开一条稍大于三角瓶口的缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖；

④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。

倒过来放置的目的是防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。向培养皿中转移已灭菌的培养基时，也不要把培养基沾在皿壁上。否则，空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培养基。

E. 请问LB培养液是什么

LB培养液是培养细菌常用的液体培养基.
配方是：
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L
氯化钠(NaCl) 10g/L
蒸馏水
将上述配方加到烧瓶中,高温高压灭菌后即可使用.

F. 我要配含卡那霉素的LB培养基，请问卡那霉素如何配，需要用滤器过滤吗如需配用蒸馏水还是去离子水配

卡那霉素100mg溶到10ml水，-20度保存，我一般不用滤器，没什么问题，去离子水就可以啊

G. 培养基怎样出去蒸馏水

放在37度烘箱里一段时间，既可以检查培养基的灭菌是否彻底，又可以使里面的水分消失，一举两得。

H. 为什么配培养基加蒸馏水

蒸馏水内没有营养物资，只是单纯的水，而琼脂也只是将培养基固体话的东西，不属于营养源，这两个东西都没有为微生物提供营养，无法供其生长，所以不能作为培养基。

I. 关于LB液体培养基

根据本人经验：酵母浸膏和酵母浸粉都用来做N源，可以相互替代，浸膏的效果好于浸粉，但称量比较困难。因为发酵是一个比较精密的工艺，建议还是称准的好，给你提供个用过的办法：取称量纸一张将浸膏“逐渐”加在纸上，尽量不要加多，否则很麻烦，之后将称量好的浸膏和纸一同放入盛少许水的三角平或烧杯中，稍许加热，称量纸就会很容易地与浸膏分离，进入水中，用镊子将称量纸取出，把溶液加入LB培养基中，即可。呵呵，一点经验，希望能对你有所帮助。

J. 求助如何用LB培养基培养大肠杆菌或金黄葡萄球菌

LB琼脂培养基用于一般细菌培养，特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。

原 理：

蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。

配方(每升)：

蛋白胨 10g

酵母膏粉 5g

氯化钠 5g

葡萄糖 1g

琼脂 15g

最终pH7.0±0.2

使用方法：

1、 称取本品36g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃灭菌15min，待冷至50℃左右倾注平板，备用。

2、取待检菌接种于平板或斜面上于36±1℃培养24h。

3、观察结果。

质量控制：

下列菌株接种后于36±1℃培养24h结果如下。